Прямой липолитик: Липолитики для похудения — что это такое: инъекции липолитиков в живот, лицо, отзывы, фото до и после

Содержание

Липолитики для похудения — что это такое: инъекции липолитиков в живот, лицо, отзывы, фото до и после

Содержание статьи:

Как действуют липолитики?

В нашем организме процессы выработки каких-либо веществ и процессы их распада сбалансированы. При неправильном питании, стрессах, нарушениях в работе щитовидной железы и по другим причинам происходят сбои. В результате синтез идет быстрее, что приводит к увеличению объема подкожной жировой клетчатки.

Коррекция липолитиками – это использование натуральных ферментов и других веществ, которые вводятся тонкими иглами в проблемные зоны и расщепляют жир. Препараты, по сути, – форма фосфатидилхолина, который производится печенью для обеспечения жирового обмена. Если этого фермента в организме мало, то обмен веществ замедляется. Липолитики поднимают уровень фосфатидилхолина и помогают исправить ситуацию.

Справка: изначально препараты разработали, чтобы устранять холестериновые бляшки. Уже в процессе применения врачи заметили, что присутствует эффект жиросжигания в местах введения. Сейчас инъекции модернизировали и с успехом применяют в косметологии.

Основные преимущества липолитиков:

Быстрый эффект в виде нормализации кровотока, восстановления метаболизма и липидного обмена.
Возможность корректировать отдельные небольшие зоны, например второй подбородок.
Процедуры позволяют избавиться от целлюлита, уменьшить жировую прослойку на 5-6 см, улучшить состояние кожи.
С помощью липолитиков можно уменьшить объем живота, убрать складки на боках, очертить талию.
Минимальный период реабилитации, отсутствие необходимости надолго выпадать из привычной жизни.

Из минусов – болезненность и возможность появления синяков.

Важно! Липолитики предназначены не для общего, а для локального похудения.

Липолитики бывают прямыми и непрямыми, то есть различаются по принципу действия.

Прямые липолитики имеют в составе вещества, которые помогают разрушать жировые клетки. К этим веществам относятся дезоксихолат натрия и фосфатидилхолин. Первое разрушает оболочку жировой клетки, а второе – ее содержимое. То есть жир буквально «растворяется», а продукты распада выходят из организма естественным путем.

Липолитики с непрямым действием косвенно влияют на процесс жиросжигания, не разрушая жировые клетки. Они ускоряют метаболизм, улучшают микроциркуляцию, обеспечивают лимфодренаж. Такие липолитики чаще всего вводят в зону лица и в другие, где объем жировой прослойки небольшой. Их результат похож на естественное похудение.

Показания к процедуре

Среди основных показаний:

второй подбородок;
лишний жир на шее и плечах;
очень большие щеки;
лишний жир на бедрах, животе, ягодицах;

большой объем жира на тыльной стороне ладоней.

Важно! Липолитики могут улучшить контур лица или убрать локальные отложения. Однако сделать из полного человека стройного они не могут.

Ограничения и противопоказания

Не всем пациентам можно провести курс процедур. Среди противопоказаний:

возраст до 18 лет;
беременность и кормление грудью;
онкология;
патологии почек и печени;
эпилепсия;
эндокринные и ряд аутоиммунных заболеваний;
нарушение свертываемости крови;
психические расстройства.

В какие части тела делают инъекции липолитиков?

Липолитики позволяют скорректировать практически любую зону:

Лицо. Обычно достаточно 4-5 процедур. В результате лицо худеет, молодеет, повышается упругость кожи, подтягивается контур лица, уменьшается носогубная борозда. Корректируется второй подбородок.

Живот. Липолитики подтягивают силуэт, сужают талию, корректируют выступающие бока. Важно после процедуры придерживаться правильного образа жизни, потому что даже незначительная прибавка в весе сведет на нет весь результат.
Ноги. Ноги целесообразно корректировать со всех сторон – комплексно. Однако можно убрать локальные дефекты – нависающую складку над коленями, чрезмерно полные икры. Липолитики позволяют выровнять бедра – как с наружной стороны (убрать «галифе»), так и с внутренней (добиться «правильного» расстояния между ногами), а также устранить с них целлюлит.
Руки. С помощью липолитиков корректируют шейно-плечевой пояс, плечи, предплечья, убирают лишний жир с тыльной стороны ладоней.
Ягодицы. Липолитики делают ягодицы упругими и подтянутыми, кожа становится плотнее, уходит целлюлит, улучшается силуэт фигуры.

Шея и зона декольте. Здесь обычно скапливается мало жира, поэтому уколы в эти зоны делаются редко.
Спина. Метод введения липолитиков позволяет убрать отложения жира с поясницы, нависающие складки на лопатках, скорректировать бока.

Как проводится процедура?

Специальная подготовка и госпитализация не требуется. Перед процедурой косметолог оценивает состояние здоровья пациента, измеряет объемы тела, чтобы отслеживать эффективность каждой процедуры. После этого индивидуально подбирается препарат и вводится тонкой иглой под кожу в проблемных областях. Глубина введения зависит от специфики липолитика.

Достигаемый результат от уколов липолитиков

Оценку эффективности можно провести уже после первой процедуры. Однако наибольший результат будет заметен после курса. Количество процедур зависит от препарата и варьируется от 3 до 8 с перерывом 8-21 дней.

В результате заметно уменьшаются объемы, улучшается состояние кожи, в зависимости от зоны введения, уходит целлюлит, жировая прослойка уменьшается на 5-6 см, устраняются морщины, улучшаются контуры лица или фигуры.

Схожие по эффективности процедуры

Часто инъекции липолитиков путают с мезотерапией липолитиками. Однако это не одинаковые процедуры.

При мезотерапии глубина прокола – до 6 мм. Этого достаточно, чтобы достать до жировой ткани, но не погрузиться в нее, поэтому воздействие поверхностное. При липолизе иглу вводят на глубину до 3 см.

При этом могут даже использоваться одинаковые препараты для липолиза и мезотерапии, например «Ревитал Целлюформ». Однако ключевой фактор – это именно глубина введения. Даже очень сильный липолитик не сможет устранить целлюлит и лишние килограммы, если его ввести на глубину 6 мм.

Как проходит реабилитация после процедуры?

После процедуры в первое время могут оставаться синяки, отечность, локально повышается температура тела. Период восстановления занимает 2-3 дня. В течение реабилитации нельзя загорать, перегреваться – посещать сауну и баню. Чтобы не замедлить процесс выведения продуктов распада жировых клеток, надо отказаться от алкоголя. Для повышения эффективности липолиза рекомендованы термолифтинг, прессотерапия, LPG-массаж.

Для сохранения результата надолго надо трижды в неделю заниматься спортом и правильно питаться.

Что можно и нельзя делать после уколов липолитиков?

На протяжении недели каждый день нужно выпивать 2-2,5 л воды, чтобы сохранять водный баланс в организме.
В первые 2-3 дня нельзя пить спиртное.
Чтобы уменьшить отеки, можно делать сухие холодные компрессы.
Если процедуры проводились на лице, то нужно перед каждым выходом из дома использовать крем от загара.

Если липолитики вводились зимой, не стоит долго находиться на холоде.
В первый день рекомендуется отказаться от декоративной косметики в зонах введения препаратов.

Виды липолитиков для похудения

Кремы

Липолитические кремы – это единственные наружные средства, помогающие похудеть. Кроме липолитиков, они содержат витамины и другие вещества, восстанавливающие баланс и закрепляющие результат. Кремы выводят из кожи шлаки и токсины, делают ее более упругой и обновленной. Потери многих килограммов ожидать не стоит, потому что кремы не проникают так глубоко, как липолитики в уколах. Однако при постоянном использовании на протяжении 3 месяцев они могут уменьшить проявления целлюлита, убрать 1-2 см в талии.

Коктейли, которые нужно пить

Такие коктейли с содержанием липолитиков можно приобрести в аптеке или магазине спортивного питания. Второй вариант предпочтительнее, потому что профессионал в этой области подскажет, какие лучше, какими свойствами обладает тот или иной напиток. Кроме того, в магазинах спортпита обычно больше выбор вкусов. Коктейли включают в ежедневный рацион и обязательно совмещают с тренировками и правильным питанием.

Капсулы и таблетки

Капсулы и таблетки тоже необходимо сочетать с физическими нагрузками, иначе результат будет не столь выраженным, как хотелось бы. Продаются они также в аптеках и магазинах спортпита, во втором случае выбор больше. Препараты хорошо воздействуют на кожу, нормализуя ее внешний вид и упругость. Однако этого можно добиться, если состояние кожи не критичное, то есть, нет серьезных провисаний и других косметических дефектов. В составе содержатся дополнительные вещества, благотворно влияющие на организм и повышающие эффективность жиросжигающих тренировок. Потеря веса не такая быстрая, как при применении инъекционной техники, полный курс – 3 месяца.

Инъекции

Самый эффективный способ – введение липолитиков инъекционно. Инъекции обеспечивают быстрый и выраженный результат, похожий на липосакцию, но не такой радикальный. Некоторые пациенты жалуются на болезненность уколов, но ее можно снизить путем нанесения обезболивающего крема. Также некоторые липолитики имеют в составе прокаин или лидокаин, которые сразу в момент инъекции оказывают обезболивающий эффект.

Названия и описания липолитических препаратов

В таблице представлены только сертифицированные препараты, разрешенные к применению на территории РФ.

Название препарата	Характеристика
«Акваликс» (Aqualyx)	Препарат известен тем, что сегодня он единственный устраняет жир, не повреждая мышцы и верхние слои кожи. Подходит для коррекции любых зон, устраняет липомы, гинекомастию, «горб буйвола». Результат – уменьшение жировых отложений на 25-35%, эффект нарастает в течение 3 недель, курс процедур – от 2 до 5 с перерывом 3-4 недели. Если вести здоровый образ жизни, результат сохраняется пожизненно без дополнительной коррекции. «Акваликс» официально зарегистрирован «Росздравом» и имеет европейский сертификат качества СЕ. Он прошел 7-летние клинические тесты, показавшие отсутствие интоксикации от его применения.
«Ревитал Целлюформ»	Комплексный препарат, имеющий в составе компоненты для мезотерапии: аминокислоты, вытяжка арники, антиоксиданты, витамины и др. Курс состоит из 5-6 процедур с перерывом в 7 дней. Чтобы закрепить результат, рекомендуется дважды в год повторять курс. Этим препаратом делают не только липолиз, но и мезотерапию.
«Дермахил ЛЛ» (Dermaheal LL)	В составе присутствуют фосфатидилхолин, который растворяет жир, стоматомедин – активный пептид, самый важный посредник в работе гормона роста, стимулирующий кровоток и активизирующей распад жира, карнитин – он выводит продукты распада жировых клеток из организма. Также «Дермахил» содержит гиалуроновую кислоту и аминокислоты – они хорошо воздействуют на кожу, увлажняют, придают красивый внешний вид, омолаживают. Другие полезные вещества в составе – комплекс витаминов. Препарат эффективен при целлюлите любой степени выраженности.
«Триада»	Имеет в составе три фермента, которые активно действуют на проблемные области. Липаза устраняет жировые прослойки, гиалуронидаза убирает целлюлит и выводит лишнюю воду, коллагеназа стимулирует выработку коллагена. Также эти ферменты регулируют большое количество процессов – минеральный обмен, состояние кожи и ее pH, обмен микроэлементов и др. Курс должен состоять минимум из двух процедур. В результате устраняется целлюлит, в том числе застарелый, убирается «апельсиновая корка», обеспечивается хороший дренаж, улучшается общее состояние кожи и нормализуются обменные процессы на уровне кожи и гиподермы.
«Дермастабилон»	Состоит из разрушающих жировые клетки солей желчной кислоты и фосфатидилхолина, который превращает жир в гелевую субстанцию. Выраженный эффект заметен после 10 процедур, которые нужно делать раз в 8-10 дней. Уколы делают на глубину 1 см.

Чем опасны липолитики: польза и вред, возможные побочные эффекты

Липолитики обладают жиросжигающим эффектом, позволяют локально удалять прослойки жира толщиной до 5-6 см. Расщепленный жир выводится из организма естественным путем, а новые жировые клетки на месте старых не образуются. Однако при этом нужно придерживаться здорового образа жизни и заниматься спортом. Любая прибавка в весе нивелирует результат, особенно это касается лица, которое может снова «поплыть», даже если человек наберет всего пару килограммов.

Чтобы уменьшить риск возникновения осложнений стоит внимательно подойти к выбору клиники и врача в частности.

К осложнениям и плохому результату приводят:

нарушение техники введения липолитика;
неправильная формула препарата;
введение в кожу или мышцы – в этом случае возможен абсцесс.

В нашей клинике для интралипотерапии используются только проверенные и сертифицированные препараты, а прием ведут высококвалифицированные врачи с медицинским образованием.

Максимальный эффект зависит от особенностей пациентов. Инъекционная методика хорошо подходит тем, у кого немного лишнего веса. Людям с ожирением липолиз никак не поможет. Кроме того, на результат влияет возраст, это касается в первую очередь состояния кожи, которая при глубоких морщинах, заломах и провисаниях не станет вновь молодой и сияющей. А вот в возрасте до 50 лет можно добиться хороших результатов, особенно на лице.

Все компоненты, которые присутствуют в препаратах, одобрены и протестированы, однако большое значение имеет конкретная формула, метод введения и дозировка.

Основные побочные эффекты

Как реакция на основные компоненты появляются синяки, гематомы, покраснение, отечность, локальное повышение температуры тела. Это типичные последствия, которые проходят полностью через 1-2 недели.

В более редких случаях появляются болезненные уплотнения в местах уколов, зуд, боль. Это симптомы аллергии на компоненты препарата. Если повышается общая температура тела, возможно, занесена инфекция – надо обратиться к врачу.

Из-за низкой квалификации врача есть риск фиброза при введении в мышцу.

Часто задаваемые вопросы

Как колоть липолитики и можно ли самому?

Сейчас в свободной продаже и даже в интернет-магазинах можно найти препараты на основе фосфатидилхолина, посмотреть в интернете дозировки и схемы введения. Однако это очень опасно и ни в коем случае нельзя самому себе делать уколы. Во-первых, это болезненно и инстинктивно вы можете просто «не дожать», то есть ввести препарат не в жир, а в кожу, что вызовет абсцесс. Во-вторых, можно попасть в мышцу, что чревато фиброзом. В-третьих, за процессом должен наблюдать специалист. Например, иногда нужно в процессе курса понизить дозировку, чтобы успела сократиться кожа, или, наоборот, повысить ее, тщательно просчитав последствия. Кроме того, в нестерильных условиях можно занести инфекцию.

Вредно ли принимать липолитики для похудения?

Многие спортсмены и люди, далекие от спорта, принимают липолитики без каких-либо негативных эффектов. Осложнения возможны при индивидуальной непереносимости компонентов. Это может быть аллергическая реакция, например, которая лечится симптоматически.

Сколько стоит процедура?

Стоимость процедуры зависит от многих факторов – желаемый результат, размер дефекта, состояние жировой ткани, кожи, общее здоровье и возраст пациента. Точную цену на курс озвучит специалист после очной консультации.

Как действуют липолитики?

Бывают липолитики прямого и непрямого действия. В первом случае специальные вещества – дезоксихолат натрия и фосфатидилхолин – разрушают жировые клетки вместе с мембранами. Жир фактически растворяется, а продукты его распада выводятся естественным путем. Непрямые липолитики влияют на процесс жиросжигания косвенно, то есть не разрушают клетки жира напрямую. Он создают условия для потери объемов – ускоряют метаболизм, улучшают микроциркуляцию, обеспечивают лимфодренаж.

Сколько процедур необходимо, чтобы получить видимый результат?

Это зависит от препарата, дозировки и обрабатываемой зоны. Иногда результат виден уже после первой процедуры, но в среднем для достижения видимого эффекта нужно от 3 до 8 сеансов с перерывом 8-21 дней.

Нужна ли подготовка к процедуре?

Специальная подготовка не требуется.

Как долго сохраняется результат?

Если вести правильный образ жизни – не переедать, заниматься спортом, – то результат сохранится на всю жизнь.

С какими процедурами лучше всего сочетаются инъекции липолитиков?

Эффективность липолиза повышают термолифтинг, прессотерапия, LPG-массаж.

виды инъекций, принцип действия препаратов

Мезотерапия тела не ограничивается процедурами, призванными в той или иной мере поспособствовать похудению, однако антицеллюлитные инъекции и курсы коррекции фигуры по-прежнему остаются самыми популярными направлениями работы по телу. Всеобщий интерес к теме снижения веса постоянно подогревается средствами массовой информации, поэтому процедуры подобного рода широко востребованы среди клиентов любого возраста, типа кожи и телосложения.

Для лечения целлюлита и уменьшения локальной жировой складки используются мезопрепараты особого типа – липолитики. Эти инъекции обеспечивают моделирующий эффект, как следует из названия, за счёт прямого или косвенного ускорения процесса липолиза – расщепления жировых клеток в зоне обработки.

В зависимости от того, каким образом препарат воздействует на клетки жировой ткани, липолитики можно разделить на две большие категории – прямые и непрямые.

Липолитики прямого действия

Действие препаратов из категории прямых липолитиков заключается в непосредственном расщеплении жировой ткани: попадая в организм, такие вещества разрушают оболочку жировых клеток, высвобождая и растворяя их содержимое. За счёт этого происходит уменьшение объёма проблемной области, причём желаемый эффект достигается сравнительно быстро.

Прямые липолитики предназначены для удаления явно выраженной жировой складки в конкретных зонах. На данный момент инъекции прямых липолитиков являются самым эффективным нехирургическим методом удаления избыточного объёма в областях, которые тяжело поддаются коррекции с помощью физических упражнений и аппаратной косметологии – таких, как нижняя часть живота и внутренняя поверхность бёдер и плеч.

При мезотерапии прямыми липолитиками препарат вводится локально на достаточно большую глубину – в подкожно-жировую клетчатку. Подобная процедура требует от косметолога не только отточенного навыка применения инъекционных методик, но и специальной подготовки по работе с препаратами прямого действия. Цена врачебной ошибки при данной процедуре может быть очень велика: неверная техника введения или неправильный выбор дозировки могут повлечь за собой как повышенный риск посттравматической пигментации, так и местный некроз тканей.

Самыми распространёнными липолитиками прямого действия являются фосфатидилхолин и дезоксихолат натрия, которые, как правило, используются в паре.

Фосфатидилхолин

Фосфатидилхолин или лецитин – это первый в истории препарат, получивший применение в качестве прямого липолитика. В начале 1980-х годов инъекции лецитина использовались для устранения холестериновых бляшек на веках. Впоследствии способность фосфатидилхолина расщеплять жировые образования начала активно использоваться в пластической хирургии и косметологии.

Липолитик фосфатидилхолин осуществляет непосредственный липолиз: проникая внутрь жировой клетки, препарат превращает тугоплавкий жир в жидкую эмульсию, которая легко выводится из организма естественным путём. Эффект от инъекций фосфатидилхолина достигается уже после 1-4 процедур.

Дезоксихолат натрия

Липолитик дезоксихолат натрия – это естественный компонент желчи, который в синтезированном виде используется совместно с фосфатидилхолином для осуществления липолиза. Его ключевой особенностью является способность трансформироваться в дезоксихолевую кислоту, которая встраивается в плотную мембрану жировых клеток, разрушая её концентрированную двойную структуру, и увеличивает её проницаемость. Это помогает фосфатидилхолину проникнуть внутрь клетки и расщепить её содержимое.

Синергетическое действие фосфатидилхолина и дезоксихолата натрия за короткое время позволяет достичь впечатляющих результатов и устранить до 6 см жировой прослойки в проблемной зоне.

Липолитики непрямого действия

В отличие от предыдущей категории препаратов, непрямые липолитики не оказывают непосредственного воздействия на клетки жировой ткани – они не провоцируют, а ускоряют липолиз, стимулируя сопутствующие ему физиологические процессы. Так, в отличие от прямых липолитиков, физически устраняющих избыточный объём, препараты непрямого действия имеют более комплексное и естественное воздействие на ткани. Продолжительность курса процедур при этом оказывается существенно дольше, а его результативность будет зависеть в том числе от ряда внешних факторов, включая объём физической нагрузки.

Непрямые липолитики используются для комплексного уменьшения объёмов фигуры и борьбы с целлюлитом. Для введения препаратов данного типа используются как различие техники классической мезотерапии, так и микроигольчатые процедуры – в том числе фракционная мезотерапия.

Список непрямых липолитиков насчитывает множество препаратов, которые можно разделить на две подкатегории в зависимости от того, какие сопутствующие липолизу условия они создают – высвобождение энергии или лимфодренаж.

Тип 1. Высвобождение энергии

В процессе естественного липолиза расщепление клеток жировой ткани сопровождается высвобождением энергии. Непрямые липолитики первого типа стимулируют обмен веществ в клетках таким образом, чтобы ускорить транспортировку свободных жирных кислот в энергетические клеточные центры – как результат, липолиз происходит более интенсивно и позволяет «сжечь» большее количество жировых клеток. При этом возникает характерное физическое ощущение тепла в зоне введения инъекций.

К числу непрямых липолитиков такого типа относятся L-карнитин, кофеин, экстракт гуараны, бромелаин, йохимбин, экстракт какао и некоторые другие препараты.

Мезотерапия с использованием непрямых липолитиков первого типа показывает максимально выраженный результат в сочетании с умеренными физическими нагрузками. Способность данных препаратов увеличивать выработку энергии обеспечивает большую продуктивность во время тренировки и более заметную потерю объёмов жировой ткани.

Непрямые липолитики первого типа рекомендованы при коррекции целлюлита плотного типа, наблюдаемого на начальных стадиях формирования проблемы. Препарат активизирует трофические процессы и улучшает кровообращение в проблемной зоне, предотвращая дальнейшую деформацию жировых клеток.

Тип 2. Лимфодренаж

При расщеплении жировых клеток помимо высвобождаемой энергии образуются продукты липолиза, имеющие вид водной эмульсии, которые со временем выводятся из организма через кровь и лимфу. Непрямые липолитики второго типа – лимфодренажные препараты – способствуют оттоку этих веществ и препятствуют образованию отёков, что позволяет ускорить процесс расщепления жировой ткани.

За счет своих лимфодренажных свойств, непрямые липолитики второго типа позволяют избавиться от излишних объёмов, вызванных избытком и застоем жидкости в тканях. Препараты данной группы способствуют улучшению тургора кровеносных сосудов и восстанавливают естественную упругость биологических тканей, что позволяет успешно использовать их в коррекции целлюлита отёчного типа, отягощённого сосудистыми патологиями.

Лимфодренажные препараты включают в себя преимущественно растительные компоненты – в том числе экстракты артишока, центеллы азиатской, зелёного чая, гинкго билоба, мелилото и некоторых других. Часто в состав лимфодренажных коктейлей включаются ангиопротекторные компоненты, предназначенные для улучшения тонуса кровеносных сосудов – троксерутин, бета-эсцин и другие.

Оцените, пожалуйста, статью

Рейтинг: 4,7 — 39 голосов

Пантелеева Ольга Владимировна

34 года, врач дерматолог-косметолог

Стаж работы — 12 лет. Эксперт, исследователь, ведущий косметолог Мезомаркета. Разработчик авторской системы тестирования новых продуктов перед добавлением в каталог Мезомаркета. Спикер конгрессов косметологов в России и странах содружества (Казахстан, Белоруссия). Автор многочисленных статей в профильных изданиях. Участник семинаров, конференций, и круглого стола косметологов.

Протокол липолитической коррекции тела препаратами TM Mesoexpert

Процедуры мезотерапии по телу являются одними из самых востребованных. Аппаратная косметология, массаж, обёртывания далеко не всегда могут решить проблему коррекции локальных жировых отложений в полном объёме. Особенно если речь идёт о сложно поддающихся коррекции зонах, таких как внутренняя часть бедра, внутренняя поверхность рук. Дело в том, что мышцы здесь минимально принимают участие в процессе движения, да и в спортзалах определённый набор упражнений в этой зоне зачастую не результативен. В таких случаях единственным гарантированным результатом обладает только комплекс процедур инъекционной мезотерапии липолитическими коктейлями.

Сосудистый препарат Vitacomplex Состав 56 компонентов: витамины В1, В2, В3, В5, В6, В8, В12, аминокислоты, олигоэлементы, венотоники, ангиопротекторы, антиоксиданты. циклодекстрин, 4% манитол, таурин, теофиллин, буфломедил.

Показания: Витаминный сосудистый комплекс для ревитализации и регенерации всех типов кожи. Подходит как стартап для более интенсивных anti-age процедур

Форма выпуска: Флакон 5 мл.

Расход на 1 процедуру 2,5 до 5 мл.

Прямой липолитик Phosphatidylcholine

Состав: Фосфатидилхолин 5% Дезоксихолат натрия 2,5 %.

Показания: Прямой липолитик для коррекции жировых отложений. Дезоксихолат натрия разрушает оболочку жировой клетки. Фосфатидилхолин эмульгирует жиры и утилизирует.

Форма выпуска: Флакон 5 мл/20 мл.

Расход на 1 процедуру не больше 5 мл на одну зону.

Непрямой метаболитик Аminocomplex

Состав:L– аргинин, L– карнитин, L– глутамин, L– метионин.

Показания: Непрямой липолитик для коррекции жировых отложений. Способствует оптимальному сжиганию жиров и высвобождению энергии.

Форма выпуска: Флакон 5 мл.

Расход на 1 процедуру 2,5 — 5 мл.

Непрямой липолитик MesoSlim

Состав: Твин-У-циклодекстрин, 4% манитол, таурин, теофиллин, буфломедил.

Показания: Непрямой липолитик для липоскульптуры лица и тела. Устраняет жировые отложения в сложно поддающихся коррекции зонах: внутренняя сторона бедра, живот, колени, подбородок, носогубные складки, грыжи нижнего века.

Форма выпуска: Флакон 5 мл.

Расход на 1 процедуру 2,5 — 5 мл.

Ход процедуры:

Перед началом курса липолитической мезотерапии до введения прямого липолитика Phosphatidylcholine, необходимо провести капилляромезотерапию препаратом Vitacomplex, за счет чего идет улучшение наполнения и скорости кровотока в микроциркуляторном русле, что позволяет снять отечность, пастозность ткани. Восстановление венозного оттока также улучшает эвакуацию продуктов метаболизма. Капиляромезотерапия – это улучшение микроциркуляции с использованием комплексных мезококтейлей, включающих ревитализирующие ингредиенты совместно с препаратами сосудистого действия – венотоников и капиляропротекторов. Благодаря капилляромезотерапии процедура липолиза будет значительно эффективнее. 1 этап. Сосудистый. Положение пациента — лёжа на животе. 1) Вдоль позвоночного столба осуществляем три линии вколов. Начинаем от большого затылочного отверстия и заканчиваем пояснично-крестцовым сочленением. Первая линия проходит между оститстыми отростками позвонков. Вторая и третья идут параллельно, справа и слева от срединной. Расстояние между вколами: 3-4 см. Расстояние между линиями вколов: 2-3 см. Глубина введения — 4мм. Расход на процедуру: 2-3 мл. 2) Вдоль внутренней стороны бедра и голени, вплоть до стопы. Инъецируем по ходу трёх линий, параллельных друг другу. Расстояние между линиями вколов: 2-3 см. Глубина введения- 4мм. Расход на процедуру: 2-3 мл.

2 этап. Коррекция локальных жировых отложений.

Для более эффективного результата, необходимо чередовать прямой липолитик с непрямым: Курс состоит из 4-6 процедур, которые чередуются друг с другом с интервалом 1 раз в неделю. 1 раз в неделю – прямой Phosphatidylcholine — до 10 мл в одну зону, следующая неделя — непрямой , 1 раз 5-10 мл (Aminocmplex или Mesoslim).

Просим пациента занять вертикальное положение, так как только в нём хорошо визуализируется проблемная зона. Троекратная обработка хлоргексидином. Очерчиваем данную зону стерильным маркером и проставляем предполагаемые места введения препарата. Расстояние между вколами — 2 см. Далее пациент принимает горизонтальное положение и мы проводим процедуру инъецирования препарата соответственно правилам введения каждого мезококтейля.

Phosphatidylcholine от MesoExpert: это прямой липолитик, в состав которого входит фосфатидилхолин 5% и дезоксихолат натрия 2,5%. Действует прицельно на жировую ткань, разрушая её и выводя продукты распада. Для препарата существуют определённые правила введения, которые необходимо соблюдать. За 1 процедуру для первого!!! сеанса вводим не больше 1 флакона — 5 мл. Глубина введения-13 мм, строго в жировую ткань. Количество препарата на 1 вкол- примерно 0,1-0,2 мл. После введения осуществляем лёгкий массаж. Предупреждаем пациента о последующих болезненных ощущениях в зоне введения на протяжении нескольких дней.

Aminocmplex — непрямой липолитик, содержит аминокислоты, которые в комплексе способствуют оптимальному сжиганию жиров и высвобождению энергии. Благодаря наличию L-карнитина в составе, особенно эффективен у людей активно занимающимся спортом. Мультипунктурная инфильтрация, 5-10 мл.

Mesoslim – непрямой липолитик, в состав которого входит маннитол, таурин и буфломедил. Дает прекрасный диуретический эффект, ингибирует фосфодиэстеразу. Непрямой липолитик для липоскульптуры лица и тела. Устраняет жировые отложения в сложно поддающихся коррекции зонах.

3 этап. Постинъекционный уход. После процедуры проводится лёгкий массаж обработанной зоны и троекратная обработка хлоргексидином. Также следует нанести средство, уменьшающее посттравматический эффект: покраснение и отёчность. На протяжении всего курса по коррекции жировых отложений, необходимо увеличить питьевой режим до 2 л в день, исключить по возможности употребление жирной пищи и алкоголя, а также совмещать инъекционные процедуры с аппаратными методиками или массажами (на 3-4 день после инъекции).

После проведения липолитической мезотерапии необходим курс лифтинговыми препаратами – для уплотнения кожи и лифтинга.

Липолитик прямого действия Lipo Lab PPC Solution (1x10ml)

Вы устали от постоянной борьбы с жировыми отложениями в самых не желательных местах?

Если пациент не в восторге от такой ситуации, значит пришло время исправить ее, используя препарат Lipo Lab PPC Solution. Препарат Lipo Lab PPC Solution представляет собой современный липолитик универсального действия. Косметологи активно используют этот препарат для устранения жировых запасов на определенных участках, которые проблематично скорректировать с помощью одних физических упражнений. Этот препарат способен исправить этот изъян внешности, а также решит ряд других проблем.

Особенность препарата в том, что он инъекционно вводится в определенные участки тела. Процедура является простой и безболезненной, а ее эффект является длительным. Именно благодаря этим преимуществам данный препарат пользуется большим спросом и является конкурентоспособным в современной косметологии.

Гель липолитик предназначен только для введения в специализированных клиниках и косметических кабинетах. Противопоказано самостоятельно пользоваться препаратом, только опытный косметолог должен вводить данный наполнитель.

Липолитик Lipo Lab PPC Solution – верный помощник при борьбе с жировыми отложениями

Lipo Lab PPC Solution – популярный южнокорейский продукт для борьбы с лишним жиром. Компоненты, входящие в средство, положительно воздействуют на участки, расщепляя жировые депо, и гарантируют длительный эффект. Благодаря пролонгированному результату, у пациента не возникает необходимость делать слишком часто повторный ввод препарата.

В состав данного средства входят следующие компоненты:

PPC (фосфатидилхолин) – вещество немецкого производства, структура которого является чистой на 99,8%;
Дезоксихолат натрия – вещество японского производителя с чистотой компонента 98%.

Что собой представляет РРС?

Фосфатидилхолин представляет собой полностью натуральный компонент: этот фермент встречается в яйцах, бобовых, семенах горчицы и подсолнуха. Роль этого фермента в человеческом организме состоит в том, что он принимает активное участие в липидном обмене в клеточных оболочках. В медицине и косметологии применяется вещество, добытое из соевого масла. Препараты, созданные на основе данного вещества, используют в качестве липолитика прямого действия. В связи со строением фосфатидилхолина, этот фермент не имеет способности растворять оболочки липоцитов, поэтому в препарат дополнительно входит в состав дезоксихолат.

Дезоксихолат представляет собой фермент, входящий в состав желчи. Сочетаясь в препарате, два активных фермента воздействуют разрушительным образом на мембраны адипоцитов. Таким образом, они приводят подкожный жир в состояние эмульсии. После того, как произошел процесс эмульгирования, ферменты выводятся из организма через кровь, почки или печень.

Свойства и характеристики Lipo Lab PPC Solution:

Говоря о препарате для избавления от лишних жировых отложений, следует отметить некоторые особенности.

Для ввода инъекции нет необходимости в использовании анестезии. Данный препарат является абсолютно безболезненным и не вызывает неприятных ощущений в виде жжения и отека в месте инъекции.
При попадании под кожу гель растворяется в тканях и разрушает жировые клетки. Липолитик истощает жир и выводит его распавшиеся остатки через потовые выделения, а также мочу.
Для того, чтобы препарат начал действовать, потребуются минимальные затраты самого препарата, а также времени пациента.
Данный препарат является эффективным средством в борьбе с целлюлитом, делая кожу ровной, приятной на ощупь и эластичной.
Липолитик Lipo Lab PPC Solution избавляет от лишнего жира в определенных частях тела, а именно в тех, где не могут помочь даже физические упражнения.
Липолитик Липо Лаб РРС Солюшн является препаратом, который обеспечит безопасное лечение, ведь он на 99,8% состоит из чистого сырья, которое стремительно увеличивает эффективность липолиза.

Предназначение и рекомендации к использованию Lipo Lab PPC Solution

Активными зонами для инъекции являются следующие зоны:

двойной подбородок,
плечи и предплечья,
подмышки,
спина и живот,
боковые складки,
ягодицы,
бедренная часть,
колени.

Инъекция осуществляется напрямую в область жировых отложений вглубь 6-13 миллиметров. Курс ввода препарата состоит из серии от 4 до 15 сеансов до получения желаемого результата. Перерыв между сеансами составляет не менее 3-4 недель.

Способ применения Lipo Lab PPC Solution:

Для того, чтобы использовать препарат, необходимо обратиться к сертифицированному специалисту. Самостоятельно не рекомендуется использовать гель!

Перед использованием препарата необходимо потрясти содержимое флакона для взвеси. На 20 миллилитров предусмотрено соблюдение следующих пропорций: 2 флакона РРС + 1 флакон липозы. Данную пропорцию следует использовать в случае коррекции фиброзного целлюлита. В случае лечения начальной стадии целлюлита, инъекция осуществляется без использования дополнительных компонентов для разведения.

Противопоказания:

Применение липолитика рекомендовано далеко не всем пациентам.

Список общих противопоказаний следующий:

Непереносимость компонентов Lipo Lab PPC Solution;
Аллергическая реакция на продукт;
Период лактации;
Эпилепсия и аутоиммунные заболевания;
Другие хронические заболевания с острым течением;
Наличие воспалительных процессов;
Инсульт;
Наличие дефектов кожи (герпес и экзема).

Если пациент входит в одну или несколько категорий, стоит рекомендовать отказ от использования препарата.

Спецификация:

Форма выпуска: флакон 10,0 мл

Производитель: MEDIHUB (Юж.Корея).

Возможно приобрести:

1 ампулу, 10 мл
упаковку, 10 мл * 10 шт.

Условия хранения: Хранить в сухом темном месте при комнатной температуре

Липолитики прямого и непрямого действия для лица и тела, список и название препаратов

Некоторые женщины категорично заявляют: жиросжигающие уколы нужны только ленивым людям. По их мнению, для того чтобы быстро похудеть достаточно сесть на диету. К сожалению, это не совсем так.
Разумеется, с помощью диеты можно избавиться от лишнего жира, однако это далеко не всегда выход из положения.

Почему худеет лицо а тело нет

Специалисты всегда советуют пациенткам правильно питаться – это действительно полезно как для красоты, так и для здоровья в целом. Но они также прекрасно понимают, как именно худеет лицо/тело. И чаще всего – жизнь несправедлива – оно теряет объем совсем не там, где нужно. Это особенности анатомии: подкожная жировая клетчатка лица и тела худеет неравномерно.

Локализованные жировые отложения являются скоплениями жира (жировой ткани), которые имеют тенденцию сохраняться, несмотря на правильное и сбалансированной диеты и физической активности.

В целом жировая ткань, является абсолютно необходимой составляющей здорового организма и выполняет большое количество функций: от поддерживающей, до терморегуляционной. «Поломка», как правило, происходит в реализации функции «запаса питательных веществ».

В организме человека непрерывно происходят процессы распада и синтеза. В норме они находятся в состоянии баланса. Однако порой случается так, что один процесс начинает преобладать над другим. Происходит это в тех случаях, когда человек неправильно питается или мало двигается. При этом синтез липидов начинает преобладать над процессом их распада.

Какой бывает жир

У всех людей разная конституция, строение скелета и характер распределения жировой ткани. Как известно, существует две формы ожирения:

— Алиментарное, или экзогенно-конституциональное ожирение;
— Локализированное ожирение — «жировые ловушки».

1) Одним из видов ожирения, от которого страдают современные жители, является алиментарное ожирение. Также его называют экзогенно-конституциональным ожирением. Такая форма ожирения самая простая. Оно развивается вследствие переедания, низкой двигательной активности (гиподинамии), особенно при наличии соответствующей наследственности.
Вероятность проявления ожирения возрастает в период дисгормональных изменений у подростков, во время беременности, кормления грудью, климакса. Сюда же относят и психогенное (вызванное стрессами) ожирение, когда человек не контролирует количество принятой пищи.

2) Локализованное ожирение помимо несбалансированного рациона питания часто обусловлено генетической предрасположенностью.
Визуально жировые карманы заметны, только если ваш вес близок к нормальному. Более того, жировая ловушка имеет четкие границы, и ее даже можно заметить со стороны. Особенно очевидны локальные отложения на фигурах стройных девушек.
Такие участки могут формироваться в разных местах: на ягодицах, бедрах, животе, в области коленей, на руках и даже на шее.

Настоящие «жировые ловушки» женщины часто путают с общим набором веса. Чтобы не было путаницы, достаточно провести простую проверку. Если тренировки проходят регулярно, вес снижается, но в отдельных местах жировые отложения не уменьшаются — это они и есть, те самые ловушки.

Локализированные жировые отложения плохо поддаются коррекции, даже при увеличении физических нагрузок и соблюдении диеты они «уходят» последними.

Как убрать жировые ловушки на теле

Как избавиться от избыточного веса раз и навсегда? Этим вопросом рано или поздно задается каждый. Причем независимо от пола и возраста. Действительно, лишний вес влечет за собой массу проблем, начиная от гипертонии и проблем с суставами и заканчивая депрессией.
Современной наукой, диетологами, предложено много способов и методов борьбы с этим явлением. Наиболее эффективными являются 3 способа, используемых либо по отдельности, либо в комплексной программе.

— 1) Консервативный способ, который заключается в создании отрицательного энергетического баланса — например, диеты, занятия активными физическими упражнениями.
Однако избавиться от жировых карманов с помощью диет и упражнений вряд ли получится.
Дело в том, что подкожный локальный жир (жировое депо) – это важный стратегический запас организма, направленный на поддержание нормальной жизнедеятельности и сохранение нужного уровня гормонов. Наличие такого объемного депо предусмотрено самой природой.
Более того, при попытках избавиться от такого жира включаются защитные механизмы, блокирующие слишком быстрое уничтожение адипоцитов. Нерациональное расщепление жировой ткани организм считает вредным, стремясь до последнего сохранять энергетические ресурсы.
Именно поэтому запасы из жировых ловушек при физических тренировках и диетах уходят медленно и неравномерно. Более того, когда режим питания возобновляется, потерянные объемы возвращаются на свои места.

2) Хирургическая коррекция зон, не поддающихся консервативным методам похудения.

Липосакция — косметическая/бариатрическая операция по удалению подкожного жира хирургическим путём. Операция производится на определенном участке (или нескольких участках) тела, например, на животе, бедрах, ягодицах.
К липосакции прибегают в том случае, если необходимо устранить подкожный жир на тех участках тела, которые «не поддаются» коррекции посредством физических упражнений и диет.

Абдоминопластика — это операция, во время которой удаляются излишки кожи и подкожного жира в области живота, боков, а также подтягиваются брюшные мышцы. Следует понимать, что это достаточно серьезная и непростая для клиентки операция, после которой понадобится длительное восстановление. Поэтому в случаях, когда есть возможность подтянуть живот при помощи иных мероприятий, врачи не рекомендуют прибегать к столь радикальным мерам.

3) Малоинвазивная, инъекционная методика введения жиросжигающих средств в подкожно жировую клетчатку.
В связи с возросшими требованиями и критериями в эстетике в целом и эстетической медицине, в частности, появился третий метод – инъекционный липолиз. Такие уколы для похудения доставляют активные липолитические компоненты адресно, именно в те места, от которых нужно избавиться.
Уколы липолитиков при инъекционном введении в проблемные зоны активно расщепляют жировые отложения и способствуют их естественному выведению из организма.

Так или иначе, с проблемой лишних килограммов и сантиметров сталкиваются даже те женщины, чьи фигуры близки к идеалу: ни изнуряющие диеты, ни занятия в спортзале не могут избавить наш организм от так называемых жировых ловушек. Они представляют собой локальные подкожно-жировые отложения, формирующие характерные выпуклости в различных частях тела.

Липолиз и липоредукция — уколы расщепляющие жир

На данный момент существует два направления в инъекционной практике для избавления от местных жировых отложений: липолиз и липоредукция.

Ранее для локального похудения использовали уколы убирающие жир, в которые входили только прямые липолитики, которые не способны позаботиться о состоянии «лишней» кожи после проведенного липолиза.
Инъекционный липолиз — это химическое разрушение жировой ткани посредством введения в нее липолитиков прямого воздействия. При этом происходит разрушение клеточной мембраны адипоцита по механизму солюбилизации и его гибель.

В отличие от липолиза, липоредукция не разрушает адипоциты (жировые клетки), а только уменьшает их, не вызывая осложнений в виде фиброза и дряблости кожи. Это стало возможным благодаря внедрению новейших липолитиков непрямого действия, призванных работать не просто с жировыми отложениями, но одновременно и с кожей.

Липоредукция — малотравматичная процедура, направленная на удаление излишних жировых тканей в небольших объемах, в основном в области лица.
Инъекционная липолитическая мезотерапия восстанавливает микроциркуляцию в дермальных тканях, способствует выводу токсинов и эффективно борется с локальным отложением подкожно-жировой клетчатки.

Как проходит коррекция локальных жировых отложений

Косметолог просит пациентку занять вертикальное положение, поскольку только в положении стоя или сидя хорошо определяются проблемные места. Проводится обработка этих мест антисептическим раствором, чаще всего это хлоргексидин. При необходимости данная область очерчивается стерильным маркером и проставляются предполагаемые места проведения уколов. Расстояние между вколами обычно составляет 2 см.
Далее клиентка принимает горизонтальное положение, после чего собственно и проводится процедура инъецирования выбранного липолитика соответственно правилам протокола.

Для препарата существуют определённые правила введения, которые необходимо соблюдать. За 1 процедуру для первого!!! сеанса вводится не больше 1 флакона — 5 мл. Глубина введения — 13 мм, строго в жировую ткань. Количество препарата на 1 укол — примерно 0,1-0,2 мл. После инъекций осуществляется лёгкий массаж. Пациент предупреждается о последующих болезненных ощущениях, чувстве жжения в зонах введения раствора на протяжении нескольких дней.

Прежде чем приступать в процедуре липолиза, нужно предварительно «подготовить» клиента — восстановить микроциркуляцию, нормализовать сосудистую проницаемость, восстановить лимфообращение, устранить фиброз, нормализовать метаболизм жировой ткани.

Липолитики для похудения — какие бывают и чем отличаются

По воздействию такие препараты бывают непрямыми и прямыми. Кратко разберем в чем разница между ними. В основе первых лежат растительные экстракты, которые при введении под кожу косвенно способствуют активизации липолиза.
Прямые липолитики влияют непосредственно на клетки жировой ткани – разрушают как сами адипоциты, так и их мембраны. В составе препаратов есть также компоненты, улучшающие микроциркуляцию, крово- и лимфоток. Благодаря этому образующиеся в результате липолиза жирные кислоты не возвращаются в первоначальное состояние.

Липолитики с непрямым действием косвенно влияют на процесс жиросжигания, не разрушая жировые клетки. Они ускоряют метаболизм, улучшают микроциркуляцию, обеспечивают лимфодренаж. Такие липолитические смеси вводят в зону лица или тела, там, где объем жировой прослойки небольшой, поскольку убрать большое количество непрямыми липолитиками не получится. Но на малых объемах работает очень хорошо — результат похож на естественное похудение.

Липолитики прямого действия

Фосфатидилхолин

Один из липолитиков прямого действия – фосфатидилхолин. Данный фосфолипид группы лецитинов является незаменимой составляющей клеточных мембран. Он состоит из холина и двух молекул жирных кислот, содержится в соевых бобах, горчичных семенах, яйцах. В человеческом организме фосфатидилхолин регулирует липидный, белковый, энергетический, ионный обмен, участвует в окислительных процессах и тканевом дыхании.

Термин «фосфатидилхолин» иногда используется наравне с термином «лецитин», хотя эти два соединения имеют различия.
Холин является компонентом фосфатидилхолина, который, в свою очередь, является компонентом лецитина.
Фосфатидилхолин – по сути, активный ингредиент лецитина. Хотя оба они тесно связаны, эти термины не всегда обозначают то же самое. В контексте косметологии принято чаще говорить о фосфатидилхолине. На этикетке этот ингредиент может быть обозначен как: phosphatidylcholine, 1,2-diacyl-glycero-3-phosphocholine, PtdCho и lecithin.

Для усиления действия фосфатидилхолина в препараты-липолитики обязательно включают дезоксихолат натрия, который в естественном виде встречается в желчи. Одна из функций этой соли – расщеплять липиды во время переваривания пищи. В составе мезококтейлей она расщепляет межмолекулярные связи в жирах, выводит из организма лишнюю жидкость.

При проведении инъекционного липолиза нельзя превышать рекомендуемые дозы фосфатидилхолина (не более 2,5 г!), поскольку при передозировке возможно поступление в кровеносное русло большого количества жирных кислот, что неминуемо чревато стерозом и жировой эмболией.

Следует заметить, что фосфатидилхолин плохо растворяется в воде, поэтому для преобразования его в форму раствора потребуется эмульгатор, в качестве которого большинство производителей составов для инъекционного липолиза используют дезоксихолат натрия.
При смешивании лиофилизата фосфатидилхолина с дезоксихолатом натрия в водной среде образуются эмульсия, происходит связывание этих молекул, что приводит к повышению биодоступности активных ингредиентов.

Дезоксихолат натрия

Натрия дезоксихолат — натриевая соль дезоксихолиевой кислоты. Является естественным компонентом желчи и основное ее действие направлено на расщепление межмолекулярных связей в жирах.
Кроме того, за счет блокирования функции реабсорбции натрия в почечных канальцах, дезоксихолат способствует усилению мочеиспускания, а значит, увеличивает диурез. Одним из эффектов этого, является уменьшение количества межклеточной жидкости и отеков.

Дезоксихолат натрия используется в чистом виде или в составе коктейлей. Игла вводится на глубину до 13 мм перпендикулярно поверхности. Расстояния между инъекциями — 20 мм. Не рекомендовано превышение дозы препарата в составе липолитического коктейля за одну процедуру в зонах:

лица, шеи, рук и области коленных суставов — 3-5 мл;
живота, спины, бедер — 5-15 мл.

Полный курс жиросжигающих уколов составляет от 5 до 15 сеансов, в среднем — 7-8 сеансов. Период между процедурами — 7-10 дней. Сразу после проведения каждого сеанса врачом-косметологом осуществляется легкий массаж зон введения липолитического препарата для его лучшего распределения. То же самое пациенту рекомендуется делать в течение первых трех дней после процедуры.

Обратите внимание. Общая доза введения препарата в чистом виде не должна превышать 10-15 мл за 1 сеанс, а число введений его — 1 раз в 3-4 недели.

После инъекции прямыми липолитиками одной области, стоит подождать 3 недели прежде чем приступать к ней повторно. При обработке разных областей, например, сначала лицо, затем живот, срок ожидания сокращается. Другую зону можно обколоть не ранее чем через неделю.

Липолитики непрямого действия

В отличие от предыдущего жиросжигающего средства, липолитики непрямого действия не способны оказывать деструкционного воздействия на адипоциты – они лишь ускоряют липолиз, стимулируя метаболический процесс.

С помощью непрямых липолитических средств быстро похудеть не получится, поскольку они осуществляют более мягкое воздействие на жировые ткани. Соответственно курс процедур будет гораздо продолжительнее, а конечный результат будет зависеть в том числе от ряда внешних факторов, включая образ жизни, режим питания и объём физической нагрузки.

Список непрямых липолитиков насчитывает большое количество препаратов, которые можно условно разделить на два типа в зависимости от того, какие сопутствующие липолизу условия они создают – жиросжигающий либо лимфодренажный эффект.

1. Сжигание жира

Метаболический процесс естественного липолиза (расщепление адипоцитов) сопровождается высвобождением энергии. Непрямые липолитики первого типа стимулируют обмен веществ в клетках таким образом, чтобы ускорить транспортировку свободных жирных кислот в энергетические клеточные центры – процедура липолиза просто «подстегивает» процесс биохимического расщепления жира. При этом возникает характерное физическое ощущение тепла в зоне введения инъекций.

К числу непрямых липолитиков такого типа относятся L-карнитин, кофеин, экстракт гуараны, бромелайн, йохимбин, экстракт какао и некоторые другие препараты.
Липолитичекие инъекции с использованием таких жиросжигающих препаратов позволяют быстрее избавиться от лишнего жира. Достичь максимально выраженного результата можно сочетая уколы с активными физическими нагрузками.
Способность жиросжигателей активировать выработку энергии обеспечивает большую продуктивность во время тренировки, что дает увеличение потери объёмов жирового слоя.

Помимо непосредственно сжигания подкожного жира, непрямые липолитики первого типа рекомендованы при коррекции целлюлита плотного типа, на первой и второй стадиях. Препарат активизирует трофические процессы и улучшает кровообращение в проблемной зоне, предотвращая дальнейшую деформацию жировых клеток.

Активные ингредиенты препарата способствуют поддержанию здорового состояния кожи, улучшают трофические процессы и ускоряют кровообращение в проблемной зоне, предотвращая дальнейшее разрастание адипоцитов.

Тип 2. Лимфодренажный эффект

При расщеплении жировых клеток помимо высвобождаемой энергии образуются продукты распада, имеющие вид водной эмульсии, которые со временем выводятся из организма естественным путем. Непрямые липолитики второго типа – лимфодренажные препараты – ускоряют отток таких продуктов распада и препятствуют образованию отечности, что позволяет нормализовать процесс расщепления жиров.

Лимфодренаж

За счет своих лимфодренажных свойств, липолитические средства второго типа позволяют избавиться от излишних объёмов, вызванных избытком и застоем жидкости в тканях.
Непрямые липолитики этой группы укрепляют стенки кровеносных сосудов и восстанавливают тургор дермальных тканей, что позволяет успешно использовать их для избавления от целлюлита отёчного типа.

Лимфодренажные липолитики включают в себя преимущественно растительные компоненты – в том числе экстракты артишока, центеллы азиатской, зелёного чая, гинкго билоба, мелилото и некоторых других.
Нередко в состав лимфодренажных липопрепаратов включаются ангиопротекторные компоненты, предназначенные для улучшения тонуса кровеносных сосудов – троксерутин, бета-эсцин и другие.

Как применяются непрямые липолитики

Чаще всего липолитические препараты непрямого воздействия вводят инъекционно, посредством уколов в глубокие дермальные слои. Однако их в отличие от прямых липолитиков доставка веществ можно осуществлять при помощи аппаратных методик: микротоков, кавитации, лазера, ультразвука, ионофореза.

Поэтому, если инъекционное введение липолитиков под кожу кажется вам слишком болезненным методом, можно воспользоваться альтернативными, аппаратными способами жиросжигания.
Процедура поможет избавиться от жира не доставляя никакой боли и особенного дискомфорта, она не травмирует кожу, не вызывает малоприятных побочных эффектов в виде синяков и отечностей
Правда эффект достигается медленнее, чем при жиросжигающих уколах, к тому же для достижения выраженного результата придется пользоваться такими средствами регулярно. Однако в качестве альтернативы инъекциям эти способы подойдут как нельзя лучше.

Стандартный курс длится от 2 до 4 недель, процедуры проводят дважды в неделю. После перерыва, не превышающего две недели, сеансы желательно повторить. Это позволит закрепить полученный ранее результат.

Какие бывают липолитики непрямого действия

Существует много непрямых липолитиков. Одним из самых популярных является кофеин – алкалоид, получаемый из чайных листьев и кофейных зерен. Является нейростимулирующим средством группы метилксантины. Кофеин имеет схожие свойства с теофиллином и теобромином. Он подавляет фосфодиэстеразу, улучшает циркуляцию крови, содействуют утилизации жирных кислот в свободном состоянии.

Непрямым липолитиком является также артишок (хофитол) – препарат растительного происхождения. Сырьем для его получения служат нераспустившиеся бутоны одноименного травянистого сорняка. Артишок содержит флавоноиды, органические масла, инулин, витамины, соли, цинарин.
Используется в качестве жиросжигателя, сосудоукрепляющего, желчегонного и противоотечного средства. Предельно допустимая дозировка экстракта артишока – 10 мл за одну процедуру.

Органический кремний (0,5% раствор монометила трисиналола салицилата), он снижает степень перекисного окисления липидов, обладает липолитическим эффектом: сжигает жиры, активизируя липазу и усиливая синтез аденилатциклазы и циклической аденазинмонофорсфатазы.

L-карнитин (азотсодержащая карбоновая короткоцепочечная кислота) является водорастворимым витаминоподобным соединением, легко синтезирующимся в организме человека из лизина и метионина.
Его отсутствие препятствует перемещению жиров в энергетические центры, где происходит их сжигание. При этом аккумуляция жиров происходит в целлюлитных зонах кожных покровов, так называемой «апельсиновой корке».

Косметологический препарат «L-карнитин» выпускают в виде 20% раствора для инъекций объемом 2, 5 и 6 мл. В качестве компонента вещество присутствует в липолитических комплексах.
Препарат «L-карнитин» назначают при лечении локального ожирения, ксантоматоза, целлюлита. Он рекомендован тем, кто активно занимается фитнесом и силовым тренингом, проходит курс электростимуляции или массажа.

Непрямые липолитики зачастую используют для усиления эффекта от применения жиросжигателей прямого действия. Результат инъекционного липолиза становится заметным через 1–1,5 месяца. В течение этого времени жир равномерно и постепенно будет уменьшаться. Так как липолитические уколы стимулируют коллагеногенез, кожа при этом не обвисает.
Для получения стойкого результата необходимо пройти курс из 10–15 жиросжигающих процедур с интервалами между ними в 2–3 недели.

Прямые липолитики

Наиболее популярные и эффективные прямые липолитики:

Fusion F-PPC — Действие липолитического коктейля направлено на борьбу с локальными жировыми отложениями. Обладает выраженным липолитическим действием.
Препарат F-PPC+ рекомендован для устранения локальных жировых отложений у пациентов с нормальным или небольшим избыточным весом.
При применении препарата F-PPC в липолитической мезотерапии отмечается быстрое уменьшение жировых отложений, устранение отечности тканей за счет нормализации крово- и лимфотока и выведении из организма токсичных продуктов обмена веществ.

Ревитал целлюформ (Revital Celluform) — Комплексный препарат, имеющий в составе компоненты для мезотерапии: аминокислоты, вытяжка арники, антиоксиданты, витамины и др.
Препарат для химического липолиза и одновременной регенерации дермы — способен не только уменьшать объем жира, но и восстанавливать регуляцию тканевого обмена при нарушениях окислительно-восстановительных процессов.
Курс состоит из 5-6 процедур с перерывом в 7 дней. Чтобы закрепить результат, рекомендуется дважды в год повторять курс. Этим препаратом делают не только липолиз, но и мезотерапию.

Lipo lab (Липолаб) – это современное, эффективное и действенное средство, позволяющее бороться с подкожным жиром в заданных местах. Его применяют в любых частях тела – на подбородке или щеках, на животе, бедрах и пр. Имеет сертификаты качества и подходит для любых типов кожи.

Курс процедур состоит из 7-15 сеансов до необходимого результата, 1 процедура в 3-4 недели.
На 20ml берут следующие пропорции: 2 флакона РРС и 1 флакон липозы (гиалуронидaза). Данную пропорцию следует использовать в случае коррекции фиброзного целлюлита. В случае лечения начальной стадии целлюлита, инъекция осуществляется без использования дополнительных компонентов для разведения.
3. В случае инъекции на живот/талию вводят 0.7-0.8ml на небольших дистанциях друг от друга.
В общей сложности потребуется 8-10 РРС- пузырьков, в зависимости от степени ожирения.

Акваликс (Aqualyx), производства Италии — первый инъекционный препарат, способный избирательно и постепенно уменьшить объемы локальных жировых отложений, не повреждая при этом поверхностные слои дермы и мышечную ткань. Липолитический препарат посредством уколов вводится в жировую ткань по специальной методике, названной Интралипотерапия и «растворяет мембрану жировой клетки».
Водно-гелевый раствор Акваликс представляет собой сочетание солей, кислот и полимеров, которые обладают способностью ускорять обменные процессы в организме. По сути, это метаболит естественного происхождения, имеющий губчатую структуру для плавного выведения жировой фракции из проблемных участков лица и тела.
Вводится только техникой интралипотерапии (субдермально, ретроградно, веерно). Доза введенного препарата не должна превышать 25 – 40 мл.

Skinasil Lipocat (Скинасил Липокат) — линия монопрепаратов и специально разработанных коктейлей для мезотерапевтической коррекции эстетических проблем. Производство ООО «Лаборатория ТОСКАНИ», Россия.
Скинасил Липокат быстро и эффективно корректирует избыточные жировые отложения, уменьшая их толщину и площадь расположения, выравнивает рельеф кожного покрова. Оказывает лифтинговое действие на ткани — дает очень быстрые эффекты «на кончике иглы».
Препарат обладает интенсивным липолитическим действием, которое максимально проявляется при подкожном введении. При сочетании сеансов лимфодренажа или физических упражнений с инъекционным введением препарата разрушаются липиды и высвобождается энергия, способствующая «сгоранию» продуктов обмена.

Препарат LipoLax Plus (ЛипоЛакс) используют в составе липолитических коктейлей для борьбы с избыточными локальными жировыми отложениями. Стимулирует выработку биологически активных веществ, непосредственно осуществляющих разрыв мембраны адипоцита.
Lipolax+ — бюджетный липолитик, неболючий. 10 мл — хорошо когда большой объем подкожно-жировой клетчатки на подбородке, в области «брылей», на жировых пакетах на лице не используется. По мере уменьшения объемов ПЖК идет переход на более мягкие липолитики или липоредукторы. Курс 1-8 процедур 1 раз в 3-4 недели.

Липолитический коктейль DERMAHEAL LL (Дермахил) используется в косметологии как липолитик с уникальным составом, в котором присутствуют инновационные компоненты. Основной задачей липолитического препарата является решение проблем со скопившимся излишним жиром
Dermaheal LL — нужно отметить что хорошо работает с бустером — сухой порошок для усиления действия, — отчего цена процедур возрастает, но уменьшается количество процедур в курсе. Можно на все участки лица от средней до нижней трети + подбородок.
После проведения процедуры нужно привыкнуть что будете небольшим «хомячком» на 3-4 дня, требует наложения самофиксирующегося или эластичного бинта на ночь все 3-4 дня, чтобы «уменьшить своего хомячка» и улучшить эффект. Курс 1-4 процедуры 1 раз в 2-4 недели.

Есть две линейки Dermaheal LL. Первая линия называется GF Mesotherapy и в составе содержится sh-Oligopeptide-2 (CG-IGF1).
Второй вид Dermaheal LL: линия называется Mesotherapy Solution, и в составе содержится Decapeptide-4 (CG-IDP2).

Косметический мезококтейль Mesoderm для коррекции фигуры, эффективно уменьшает объем избыточных жировых отложений. Показан при целлюлите любой стадии, оказывая комплексное воздействие, влияя на все звенья патогенеза состояния. Рекомендуется при проблеме фиброзного целлюлита.
Активные компоненты Мезодерм оказывают стимулирующее действие на процессы липолиза, способствуют выведению избыточной жидкости, восстанавливают кровообращение и улучшают лимфодренаж, укрепляют сосуды, тонизируют и подтягивают кожу, способствуют выравниванию кожного рельефа.

Непрямые липолитики, липоредукторы

MesoSculpt c71 часто используется в косметологических клиниках и салонах красоты. Этот препарат, в составе которого содержатся липолитики и пептиды, помогает моделировать фигуру, устранять жировую ткань, целлюлит. Средство хорошо подтягивает кожу, она становится гладкой и ровной. Благодаря активному продуцированию эластина и коллагена после введения препарата удается снизить количество жировых отложений в области лица
MesoSculpt c71 — Содержит комплекс активных компонентов, принимающих участие в процессах липолиза. Препарат изменяет биологическую активность жировых клеток, но не оказывает на них химического или физического разрушающего действия.
Оказывает жиросжигающее, дренажное воздействие, ускоряя обменный процесс в тканях. В основе средства лежат натуральные компоненты и вещества, безопасные для здоровья. Максимальный эффект достигается спустя 4–6 сеансов.

Light Fit (Лайт Фит) — липоредуктор непрямого действия крайне комфортного при введении, идея его действия — ускорение механизма распада жиров и лимфодренажный эффект.
Современный препарат Лайт Фит даёт отличные результаты и пользуется заслуженным признанием специалистов клиник красоты.
С его помощью можно скорректировать такие участки тела, как живот, бока, бедра и т.д., так же можно уменьшить деликатные проблемные зоны лица, щеки и подбородок.
Процедура проходит очень быстро и безболезненно, в препарате всего 2 мл, курс процедур от 2х до 8 процедур 1 раз в 7-14 дней.
Состав: природная соль, натуральные экстракты грецкого ореха, каштана, раскрытого прострела.

FAT NORMALIZE — Непрямой липолитик для липоскульптуры лица и тела. Устраняет жировые отложения в сложно поддающихся коррекции зонах: внутренняя сторона бедра, живот, колени, подбородок, носогубные складки, грыжи нижнего века.
Достаточно болезненный, подойдет тем, у кого позволяет потерпеть болевой порог и кому нужно за раз ввести 20 мл активного вещества. Курс 1-8 процедур 1 раз в 3-4 недели.
Препарат хорошо работает в сочетании с сеансами лимфодренажа и физическими упражнениями, тогда от него появляется максимальный эффект.

Слим Боди / Slim Body — Непрямой липолитик, содержит активных компонентов, которые способствуют оптимальному сжиганию жиров и высвобождению энергии.
Скинасил Слим Боди эффективно борется с жировыми отложениями и неровностью кожи, эффектом апельсиновой корки. Он ускоряет метаболизм клеток, благодаря чему продукты распада незамедлительно выводятся из организма, не оказывая разрушительного действия на кожу.
Благодаря наличию L-карнитина в составе, особенно эффективен у людей активно занимающимся спортом.
Препарат «Слим боди» можно использовать самостоятельно, а также возможно сочетать его с другими липолитическими препаратами.

Южнокорейский липолитик V-Line Solution предназначен для удаления подкожных жировых отложений, целлюлита, улучшения цвета лица и разглаживания морщин. Применяют на лице и области шеи.
V-Line Sol имеет хорошо подобранный состав, который позволяет не только корректирует жировые отложения в области щек, подбородка, но и стимулирует процессы регенерации кожи, значительно улучшая её качество и создавая видимый лифтинговый эффект.
Активный состав: Экстракты плодов грецкого ореха и экстракт конского каштана, л-карнитин, термус термофилуса, тирозин. Эти компоненты также стимулируют циркуляцию лимфы, улучшают метаболизм и жизнедеятельность клеток.
По отзывам, этот липолитический комплекс не дает отеков, соответственно имеет короткий период реабилитации.

Мезотерапевтические коктейли для похудения — что входит в состав

Прямые и непрямые липолитики в составе коктейлей применяются и в мезотерапии. Комплекс процедур инъекционной мезотерапии липолитическими коктейлями способен не только оптимально соотнести косметическое и лечебное воздействие на проблемный участок, но и на дерму в целом. Ниже представлены наиболее часто используемые компоненты входящие в состав мезококтейлей для похудения.

✓ Кофеин (Caffeine 20%) имеет липолитическое действие (способствует расщеплению жировых клеток).

✓ Экстракт артишока (Artichoke Extract 2%) имеет липолитическое, гепатопротекторное, желчегонное и дренажное действие.

✓ Экстракт Гинкго Билоба (Extract Ginko Biloba 4%) оказывает антиоксидантное, вазодилатирующее, противоотечное, диуретическое и нейропротективное действие.

✓ Натрия дезоксихолат (Sodium Desoxicolatе) оказывает липолитическое действие (увеличивает проницаемости клеточной мембраны и лизис адипоцитов с выходом в межклеточное пространство).

✓ Фосфатидилхолин — (Phosphatidylcholine 5%) — фосфолипид, прямой липолитик, входит в состав клеточной мембраны, растворяет липиды внутри клетки с последующим их фагоцитозом.
Сочетание Фосфатидилхолина + дезоксихолат натрия дает очень хороший результат. Например, препарат Дермастабилон (Dermastabilon). Состав: фосфатидилхолин 50 мг/мл, дезоксихолат 20 мг/мл.

✓ L-карнитин (l-carnitine) – аминокислота, связывает свободные жирные кислоты, обладает липолитическим, анаболическим действием.

✓ Лидокаин, прокаин, мезокаин – оказывают обезболивающие действие.

✓ Гиалуроновая кислота — необходимая составляющая человеческого организма. Ее главная роль регулировать водный баланс тканей в организме и участвовать в процессах синтеза коллагена и эластина.

✓ Кальцитонин (Calcitonin) оказывает противовоспалительный и противоотечный эффект, имеет много побочных действий, из-за чего его редко используют.

✓ L-аскорбиновая кислота или Витамин C (Acidum ascorbinicum) представляет собой мощный антиоксидант, нормализует окислительно-восстановительные процессы. Присутствует при образовании тетрагидрофолиевой кислоты, а также участвует в регенерации тканей, синтезе стероидных гормонов, коллагена, проколлагена, нормализует проницаемость капилляров.

✓ Органический кремний (organic Silicium) – способствует процессам регенерации и удержанию влаги в коже.

Методика эффективна для коррекции незначительных жировых отложений в области живота, коленных чашечек, подбородка, рук и т.д.

Техника введения препарата может быть как папульная, так и наппаж. Расход мезопрепарата для лица составляет 1–2 мл, для тела – 6 мл.

Мезодиссолюция

Мезодиссолюция – это дополняющая техника при проведении классического липолитического сеанса мезотерапии с целью достижения более выраженного липолитического эффекта.

Сочетается с классическим липолитическим сеансом мезотерапии с соблюдением всех этапов его проведения. В основе данной техники лежат законы осмотического транспорта растворителя из области с более высокой концентрацией в область с более низкой концентрацией через полупроницаемую мембрану.
Применение гипоосмомолярного коктейля приводит к набуханию адипоцита и разрыву его мембраны.
Применяются гипотонические коктейли (100 и 120 mOsm/l), при этом осмомолярность адипоцитов составляет 300 mOsm/l. Обязательное применение в составе коктейля витамина С, кофеина или липолитических коктейлей на основе кофеина, а также воды для инъекций.

Как делаются уколы для расщепления жира — курс процедур

Курс проводимых процедур препаратом рассчитывается исходя из исходных данных пациента, желаемого результата, места проведения инъекций.

Для устранения целлюлита необходимо до десяти процедур, каждая из которых проводится с интервалом в две недели. Врач использует максимально большую длину иглы, которую вводит перпендикулярно прямо в жировую клетчатку через каждые полтора сантиметра.

Для устранения второго подбородка используется аналогичная схема, но промежуток между процедурами составляет не две недели, а всего 10 дней, так как все процессы в тканях лица происходят намного быстрее.

Для коррекции овала лица врач вводит препарат небольшими порциями по 0,2мл препарата через каждый сантиметр, по массажным линиям лица. Промежуток между курсами составляет 10 дней, таким образом, желаемый результат достигается за два месяца процедур.

Сколько нужно сделать уколов для сжигания жира

Доза в одну точку инъекции составляет от 0,1-0,2 мл (общий объем раствора не более рекомендованного производителем). Расстояние между инъекциями 2,0-2,5 см. Инъекции производятся в гиподерму – в места с избыточными локальными жировыми отложениями.

Для введения липолитиков применяют иглы либо канюли размером 27 или 30G.

Канюля – это модифицированная тупоносая игла, без режущего острого края. Скруглённый кончик «раздвигает» ткани, позволяя избежать их травмирующего разрезания.

Инъекции делаются под углом введения 90 градусов к поверхности кожного покрова с помощью иглы 0,3х13 мм. 0,3х7 мм. на глубину 10–13 мм на теле, (за исключением «вдовьего горба» на шее, где глубина введения составляет порядка 6–8 мм. Глубина внедрения иглы при проведении процедур в области лица не превышает 6 мм.
Вынимать иглу/канюлю из тканей разрешается только после того как прекращено давление на поршень шприца.

Неправильная дозировка

В погоне за быстрым результатом и из-за боязни потери клиента некоторые недобросовестные косметологи могут намеренно увеличивать дозировку и объем липолитиков.
Однако работа специалиста должна быть направлена на естественное восстановление физиологической регуляции жизнедеятельности и темпов репаративной регенерации тканей кожного покрова.
А здесь много и сразу не значит лучше. Неоправданно увеличивая дозировку липолитиков, специалист, как правило, не учитывает побочное действие самого препарата и побочные эффекты при увеличении объема вводимого раствора. Например, количественного увеличение липопрепаратов содержащих фосфатидилхолин может привести к стойким воспалительным пораженим кожных покровов, увеличить риск гиперпигментации, а несоблюдение глубины введения препарата грозит некрозом тканей.

Когда будет виден эффект от процедуры

Тех, кто ожидает от введения препарата значительного уменьшения веса тела, ждет разочарование. Одна процедура может вывести значительный объем жировой ткани, но нужно учитывать тот факт, что жир весит намного легче костей, мышц и кожи, потому добиться значительного снижения веса с его помощью не получится. А вот уменьшить объемы тела или отдельных его частей можно.

Реальный результат работы непрямого липолитика можно наблюдать не раньше трех недель после процедуры. Первые две недели (со слов косметологов) липолитик борется с отложениями и в последующие две недели активно их выводит через почки и печень.

Для более эффективного результата, необходимо чередовать прямой липолитик с непрямым: Курс состоит из 4-6 процедур, которые чередуются друг с другом с интервалом 1 раз в неделю. 1 раз в неделю – прямой — до 10 мл в одну зону, следующая неделя — непрямой , 1 раз 5-10 мл.

Как долго держится результат после липолиза

Что касается продолжительности полученного эффекта после уколов липолитиками, то однозначного мнения на эту тему у специалистов пока что нет. В рекламных материалах производителя и некоторых клиник указывается, что, как и в случае с классической липосакцией, результат перманентный: разрушенные жировые клетки не восстанавливаются. Однако ряд практикующих специалистов, в том числе и отечественных, считают, что в ходе липолиза разрушаются не сами жировые клетки, а только их содержимое, которое, если не соблюдать режим питания и не поддерживать физическую активность, вполне может постепенно «нарасти» снова.

Побочные эффекты

К ожидаемым побочным реакциям, наблюдаемым после процедуры липолиза, относятся отек, покраснение, гематомы. При введении прямых липолитиков часто присутствует чувство жжения в местах нахождения раствора. В случае с непрямыми липолитическими коктейлями единичные случаи ощущения жжения могут быть обусловлены гиперчувствительностью к компонентам инъекционного раствора, чаще всего к консерванту – бензиловому спирту.

Возможные осложнения

Обо всех осложнениях после проведения инъекционного липолиза клиента должен оповестить проводящий ее специалист. Сделать это следует на предварительной консультации, чтобы клиент имел время оценить все потенциальные риски.

Основными причинами развития осложнений чаще всего являются неправильная техника проведения уколов, введение слишком большого объема липолитиков (особенно это касается прямых), несоблюдение протокола процедуры (глубины введения препаратов, слишком маленькое расстояние между точками вколов и пр.), ошибка в дозировке, выборе оптимального липолитического коктейля.

Следует помнить, что, при всей своей кажущейся простоте, липолиз достаточно серьезная процедура, которая требует специальной подготовки, поскольку в неумелых руках он в лучшем случае может быть не будет достигнут требуемый эффект, а при худшем варианте – приведет к развитию побочных эффектов и осложнений.

При использовании липолитиков прямого действия следует соблюдать осторожность — нельзя превышать рекомендуемые производителем дозировки фосфотидилхолина (не больше 2,5 г.), иначе при передозировке возможно попадание в кровеносные сосуды большого количества жирных кислот, что вероятно приведет к стенозу и жировой эмболией.

При возникновении осложнений

Если у вас держится высокая температура (более 37,8 °С), нарастают болевые ощущения в местах уколов, ее пульсация, присутствует длительная стойкая отёчность, покраснения кожного покрова – в этом случае клиентке необходимо обратиться к лечащему врачу.

Противопоказания и ограничения

Что необходимо учитывать при назначении инъекционного липолиза?

Необходимо помнить, что эта жиросжигающие мероприятия имеют системное действие. После того, как часть жировых клеток погибла, их содержимое вместе с токсинами, которые в них депонировались, с остаточным объемом препарата, будет с током лимфы поступать в системный кровоток и утилизироваться в печени, выводиться через почки.
А если учесть, что в области локальных жировых отложений крово- и лимфоотток зачастую затруднены и наблюдаются застойные явления, возникает необходимость задуматься об эвакуации и утилизации этих продуктов.

Отсюда вытекает список противопоказаний к проведению процедуры инъекционного липолиза:

хронические или острые заболевания печени;
почечная недостаточность;
сахарный диабет;
заболевания сердца;
нарушения кровообращения (лимфостаз, варикозное расширение вен).

Это не полный список противопоказаний, но уже отсюда можно сделать вывод: часть пациенток имеет противопоказания к проведению инъекционного липолиза, о которых может не догадываться.
В нынешних реалиях, при отсутствии диспансеризации косметолог – часто единственный за несколько последних лет врач, который наблюдает пациента, а ведь многие из перечисленных заболеваний могут протекать скрытно, никак не проявляя себя до поры до времени. Поэтому так необходим анамнез, назначение необходимых исследований. Нет ничего необычного в том, что специалист направляет на общий анализ крови или УЗИ.

Восстановление после липолиза

Многих пациентов интересует вопрос, требуется ли восстановление после липолитической мезотерапии лица и в чём оно заключается?

Для того, чтобы реабилитация после липолитического сеанса прошла комфортно и без побочных эффектов, необходимо:

— Первые 7 дней после процедуры, для вывода из организмов продуктов разрушения жировых клеток, употреблять не менее 2 литров питьевой воды в сутки.

— В течение 3 дней после сеанса липолиза не принимать ванны, ограничившись тёплым душем.

— Также, на весь этот период отказаться от посещения от бассейна, сауны, солярия, и, разумеется, пляжа.

— Пока не заживут ранки в местах введения липолитиков, воздержаться от использования декоративной косметики.

— На весь период реабилитации отказаться от занятий спортом и других физических нагрузок.

— Если процедуры проводились на лице, в летнее время, то нужно перед каждым выходом из дома использовать крем от загара. Если липолитики вводились зимой, не стоит долго находиться на холоде.

Гематомы можно обрабатывать мазью «Траумель» или «Арника». При использовании некоторых липолитиков предполагается ношение компрессионного белья в течение 3-4 дней.

Уколы для похудения в домашних условиях

Сейчас в свободной продаже и даже в интернет-магазинах можно найти препараты на основе фосфатидилхолина и других жиросжигающих препаратов, посмотреть в интернете дозировки и схемы введения. В связи с этим многие женщины задаются вопросом, можно ли проводить сеансы инъекционного липолиза самостоятельно? Нет, ни в кое случае — это очень опасно и ни в коем случае нельзя самому себе делать уколы. При всей кажущейся простоте это очень серьезная процедура, неправильное введение липолитиков чревато серьезными осложнениями.

Процедура липолитической мезотерапии требует высокой квалификации врача-косметолога проводящего инъекционные мероприятия, поскольку введение липолитиков предполагает не только знания анатомии, но и понимания процессов происходящих при липолизе и после него, а также специальных условий для проведения сеанса.
Поэтому, уколы липолитиками необходимо делать только медицинских центрах или специализированных клиниках, и только специалистами с высшим медицинским образованием.
Попытка сэкономить, обратившись к «доморощенному косметологу», а тем более делать уколы самостоятельно может привести к тяжёлым последствиям, как для внешности, так и для здоровья в целом.

Плюсы и минусы липолитиков

Почему некоторые косметологи предпочитают обходиться без инъекций липолитиков, проводя комплексные «похудательные» мероприятия?

— Во-первых, это долго. Для выраженного эффекта нужно как минимум шесть-восемь процедур на каждую зону.

— Во-вторых, присутствует травматичность и болезненность самой процедуры липолиза. Ведь она предполагает множественные инъекции с расстояниями между вколами 1,5–2 см.

— В-третьих, само восстановление может затянуться и на неделю. Отечность после инъекционных мероприятий обычно сходит за два-три дня, однако гематомы держатся куда дольше. Как раз до следующего сеанса липолиза.

Кроме того, липолитические уколы в любом случае вызывают некоторую интоксикацию, а это дает нагрузку на печень, почки, иммунную систему. Прямые липолитики активно разрушают жировые клетки, и расщепленные вещества попадают в межклеточное пространство.
После одного сеанса вы можете ничего и не почувствовать. Но если вводить в лицо/тело более 5 мл липолитиков раз в неделю, то после курса — а это может быть и десять процедур — у любого человека будет интоксикация продуктами распада.

Основная цель инъекционного липолиза – коррекция тех проблемных зон, где жир очень трудно убрать с помощью диеты и физических упражнений. Из этого следует, что такие уколы – это, в первую очередь, вспомогательная мера.

Липолиз не стоит рассматривать в качестве «курса для похудения» в широком смысле этого слова. Действуют липолитики исключительно локально, то есть в той зоне, в которую сделана инъекция.

Липолитики как действуют, липолитическое действие, липолитический эффект это

Мезотерапия — процедура, при которой фармакологические препараты вводятся подкожно с целью придания фигуре идеальных форм и улучшения состояния кожи. Это один из эффективных способов борьбы с лишним весом и устранения целлюлита в проблемных зонах. В ходе проведения мезотерапии применяются специальные мезококтейли, которые регулируют липидный обмен, помогают убрать недостатки в виде складок, уменьшить объемы тела, откорректировать область живота.

Многих пациенток интересует, липолитики — что это и как действуют, какие отзывы? В коктейли входят несколько основных компонентов: дезоксихолат натрия, фосфотидилхолин, растительные экстракты, кофеин, кремний, L-карнитин. Выведение организмом продуктов распада происходит естественным путем: через кровеносную и лимфатическую системы. Зоны коррекции — область бедер и ягодиц, руки, плечи и спина, область щек и второго подбородка. Также вводят липолитики в живот — такая методика обеспечит быстрый эффект с первых сеансов.

Уколы врачи-косметологи рекомендуют как способ устранения локальных отложений и лечения целлюлита. Это коррекция фигуры без диеты и тренировок в спортзале, при этом в ходе проведения сеансов не наносится вреда для здоровья пациента. За счет особой техники введения иглы уколы безболезненны и обладают высокой эффективностью — способствуют быстрому похудению, уменьшению локальных накоплений. Предлагаем рассмотреть подробнее, липолитики — что это, как они действуют, куда колют и как проходит инъекционный липолиз?

Прежде чем попробовать инъекции, стоит разобраться что это за липолитики, как действуют и какой результат можно получить. С помощью инъекций можно решить проблему лишнего веса и подкожных отложений, убрать целлюлит.

Жиросжигающие уколы

Липолитики — это средства на основе натуральных компонентов, которые расщепляют жировые клетки. В их состав входят ферменты сои, они биосовместимы и встречаются в виде пищевых добавок. Основным является компонент под названием лецитин, который вырабатывается печенью. В организме постоянно происходят процессы распада, и вещество принимает активное участие в расщеплении клеток жира. При малоподвижном образе жизни накапливаются излишки жира, которые откладываются в подкожную жировую клетчатку, на стенки сосудов. В таком случае синтез липидов преобладает над процессом их сжигания. Однако одного лецитина недостаточно, поэтому необходимо добавлять дополнительные элементы.

При инъекционных методиках подразумевается подкожное введение комплексных препаратов — мезококтейлей, которые составляются индивидуально для каждого пациента. Добавление специальных компонентов помогает добиться помимо распада жировых тканей улучшения внешнего вида кожи на любых участках лица и тела. Результатом становится устранение лишних отложений.

Инъекции липолитиков позволяют адресно воздействовать на клетки, улучшая их метаболизм, задействуя процесс расщепления клеток адипоцитов регулярными введениями коктейлей с комплексным составом. Достаточно от 4 до 6 сеансов, чтобы добиться эффекта похудения, уменьшить объемы живота или объемы щек, убрать бока, откорректировать зону бедер или область подбородка.

Принцип действия лекарств

Многих пациенток интересуют эффективные и безопасные способы коррекции фигуры. Узнайте, как липолитики работают, и курс в нашей клинике поможет Вам избавиться от лишних сантиметров.

Механизм работы активных веществ следующий:

влияние на процессы липолиза;
переработка клеток жира в эмульсию;
улучшение метаболизма;
нормализация микроциркуляции крови.

После применения липолитиков достигнутый результат сохраняется долгое время — обработанный участок тела не накапливает жиров.

Инъекции липолитиков, в основе которых комплекс натуральных ферментов, восстанавливают нарушенный липидный обмен. Колоть их рекомендуется в проблемных местах. Врачи используют тонкие иглы, подбирая глубину введения индивидуально — от 6 до 12 мм. Уколы безболезненные. В результате липолиза пациенту не наносится вреда.

Разновидности

У женщин, которые хотят убрать жировые отложения с проблемных участков на лице и теле, часто возникают вопросы: чем различаются прямые и непрямые липолитики, что ждать от инъекционного липолиза?

Препараты выпускаются в форме инъекций. Они способствуют распаду жиров, но их липолитическое действие выражается по-разному.

Использование прямых липолитиков позволяет добиться большего эффекта при локальных отложениях — они уничтожают мембрану жировой клетки, воздействуют непосредственно на подкожно-жировую клетчатку.

Действие непрямых липолитиков более мягкое и щадящее — они способствуют похудению, улучшают внешний вид проблемных областей, в областях введения препарата состояние кожи становится лучше. Они оказывают только косвенное влияние на процесс сжигания жира. Стоит отметить, что в клетках улучшается микроциркуляция, ускоряется метаболизм, также препараты оказывают лимфодренажный эффект.

Однако чаще всего применяются первые, самые известные среди них:

фосфатидилхолин — один из самых эффективных фосфолипидов группы лецитинов;
дезоксихолат натрия — один из важных компонентов мезококтейлей, который в естественном виде встречается в желчи;

Мезотерапевтические препараты уменьшают объемы жировой ткани изнутри, поэтому часто на курсах мезотерапии вводят прямые липолитики в живот и другие проблемные зоны. Они дают быстрый и заметный результат — заметное уменьшение объема бедер, избавление от галифе, боков, двойного подбородка, коррекция локальных отложений на теле и лице.

Компоненты липолитиков — натуральный комплекс биосовместимых веществ, поэтому они не дают побочных эффектов. В составе есть элементы, улучшающие лимфоток и кровообращение. В итоге жирные кислоты, образующиеся в ходе липолиза, не возвращаются в первоначальное состояние.

Мезотерапия является эффективным методом снижения веса и альтернативой спорту, ее проводят курсами. В современной косметологии применяют липолитики непрямые и прямые, они оказывают липолитическое действие разной интенсивности, стимулируют выведение излишков жира.

Как проходит процедура

Уколы липолитиками активно используются для избавления от жировых отложений. Целью является активация естественных жиросжигающих процессов в организме, которые называются липолизом.

Путем инъекций действующее вещество вводится в дерму с помощью тонких игл. Глубину прокола во время сеансов врач определяет в индивидуальном порядке для каждого случая.

Основные этапы:

До начала сеанса производится сбор анамнеза, подбор активных компонентов для составления коктейля. В состав мезококтейлей входят вещества, способные расщеплять жировые клетки.
Во время проведения липолиза коктейль вводится врачом-косметологом с помощью специальных тончайших игл. Обычно требуется 1-3 ампулы объемом 5-10 мл для каждой зоны воздействия. При необходимости используется аппликационная анестезия, снижающая чувствительность. Благодаря инъекционному введению состава удается добиться устранения лишних жировых отложений. Липолитики помогают пациенткам похудеть в любой части тела на 4-6 см и стать стройнее.
Участок кожи обрабатывается специальными кремами с успокаивающим эффектом. После сеанса пациенту рекомендуется отдохнуть и выпить стакан воды, чтобы быстрее вывести из организма продукты распада. Реабилитационный период длится 2-3 дня.

При мезотерапии препараты вводятся в дерму на глубину не более 6 мм, при липолизе — на 10-12 мм. Это позволяет доставлять лекарство прямо к клеткам. При инъекциях липолитиков у пациента не возникает болезненных ощущений, только легкое жжение, затем может появиться небольшая отечность. Длительность косметологической процедуры составляет не более 15-20 минут.

Мезотерапия липолитиками получила положительные отзывы пациентов. Во время проведения процедуры липолиза в организме происходит распад липидов. Врачи-косметологи используют препараты с натуральным составом, их вводят в живот и другие участки. Липолитическое действие сохраняется в течении нескольких лет. Уколы красоты также устраняют целлюлит.

Показания

отложения на животе, бедрах, спине, ягодицах;
наличие двойного подбородка, объемных щек;
поражение кожи целлюлитом.

Противопоказания

беременность и период грудного вскармливания;
плохая свертываемость крови;
злокачественные новообразования;
хронические инфекции и воспаление;
нарушения в работе иммунной системы;
сахарный диабет;
камни в желчном пузыре, патологии;
аллергические реакции на состав.

О наличии заболеваний и патологий следует уведомить врача-косметолога. Также рекомендуется выбрать другие способы похудения.

Эффективность

Сегодня косметология предлагает безопасные и безболезненные методики похудения. После прохождения курса липолитиков Вы сможете смоделировать фигуру и улучшить форму лица. Количество сеансов зависит от состояния пациента, его возраста, веса и выраженности проблемы, зоны обработки.

Рекомендованный курс — 6 процедур, интервал между которыми составляет не более 2 недель. Стоимость услуги весьма демократичная.

Результатом введения коктейлей становится устранение лишних подкожных накоплений и достижение идеальных параметров. Достигнутый после процедуры липолитический эффект сохраняется длительное время. Уколы красоты рекомендуется совмещать с ручным или аппаратным массажем, обертываниями, прессотерапией, термолифтингом.

Beauty Shop — Pluryal mesoline facecontour – Прямой липолитик для лица / Четкий овал 5 ml

Описание: СТРАНА ПРОИЗВОДСТВА: Люксембург ОПИСАНИЕ ПРЕПАРАТА: ДЕЗОКСИХОЛЕВАЯ КИСЛОТА 10МГ/МЛ (ФЛАКОН 5 ml) ОПИСАНИЕ ПРОДУКТА Показания Коррекция локализованных жировых отложений в нижней трети лица (контурирование лица) Целевая группа пациентов Мужчины и женщины, имеющие локализованные жировые отложения: двойной подбородок нижние скулы Зоны обработки Нижняя треть лица (исключительно). СОСТАВ: Вода, дезоксихолевая кислота, экстракт конского каштана, экстракт хвоща полевого, экстракт гинкго билоба, денатурированный спирт СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ: ТЕХНИКА ВВЕДЕНИЯ: Введение на глубину 8-12 мм иглой или при помощи канюли Дозировка: Одна процедура состоит максимум из 50 инъекций по 0,2 мл каждая (всего до 10 мл), расположенных на расстоянии 1 см друг от друга. Может проводиться до 6 отдельных процедур с интервалом не менее 1 месяца. Инъекции в зону коррекции Использование ледяных/ холодных компрессов, местной и/ или инъекционной местной анестезии (например, лидокаина) может повысить комфортность процедуры для пациента. Обведите планируемый участок коррекции хирургической ручкой и размеьте зону введения сеткой по 1 см. НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ Антисептический раствор для местного применения без спирта Одноразовые материалы для проведения процедуры: Игла для инъекций 30 калибра или меньше Стерильные бинты и перчатки Стерильный шприц 1 мл Дерматологическая ручка МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ: Избегайте инъекций вблизи области краевого нижнечелюстного нерва. Крайне важно правильное расположение иглы относительно нижней челюсти, снижающее вероятность повреждения краевого нижнечелюстного нерва, моторной ветви лицевого нерва. Повреждение нерва выражается в асимметричности улыбки из-за пареза депрессоров губы. Чтобы избежать травмы краевого нижнечелюстного нерва: Не вводите препарат выше нижней границы нижней челюсти. Не вводите препарат в области, лежащей в 1-1,5 см ниже нижней границы (от целевой подбородочной зоны). Вводите продукт только в пределах целевой области коррекции жировых отложений Избегайте инъекций в платизму Перед каждой процедурой пальпируйте подбородочную область, чтобы убедиться в наличии достаточного количества субментального жира и определить расположение подкожного жира между дермой и платизмой (предплатизменный жир) в зоне коррекции. Количество инъекций и количество процедур следует подбирать индивидуально, с учетом распределения жира и целей лечения. КУРС: 1 процедура 1 раз в 3-4 недели, всего 4-6 процедур Всего 5-10 мл на 1 процедуру ФОРМА ВЫПУСКА: Флакон, 5мл ПОКАЗАНИЯ: Показания к применению: уменьшение второго подбородка коррекция контуров нижней трети создание идеального овала

Липолиз — обзор | Темы ScienceDirect

Липолиз

Липолиз приводит к образованию свободных жирных кислот (СЖК), которые представляют собой энергетические субстраты для многих сырных микроорганизмов. Липолиз гораздо более обширен у созревших сыров, чем у других сортов (Gripon, 1993). P. camemberti продуцирует большое количество экзоцеллюлярной липазы (Cerning et al., 1987, Molimard and Spinnler, 1996), которая является основным агентом липолиза в сырах типа камамбер.В голубых сырах Cakmakci et al. (2013) описали в три раза более высокий уровень свободных жирных кислот и более летучий состав по сравнению с другими сырами. Две внеклеточные липазы P. roqueforti (одна кислая и одна щелочная) и одна внутриклеточная липаза (Menassa and Lamberet, 1982) могут участвовать в таком высоком уровне липолиза в голубых сырах; хотя их важность во время созревания не ясна. Метилкетоны и соответствующие им вторичные спирты, образующиеся в результате 3-окисления СЖК во время липолиза, вносят свой вклад в типичный вкус созревших сыров (Cerning et al., 1987). Липолитическая активность сильно различается в зависимости от штамма (Larsen and Jensen, 1999) и представляет собой важный критерий отбора для P. roqueforti и P. camemberti . Липолитическая активность дополнительных культур Mucor не была хорошо охарактеризована, но хорошо известно, что видов Mucor продуцируют липазы (Alves et al., 2002; Sharma et al., 2001), которые могут использоваться в качестве препаратов для ускорения созревания сыра. (Хуанг, 1976). Дрожжи способствуют липолизу сыров, а Y.lipolytica обладает самой высокой липазной активностью из всех дрожжей, обнаруженных в сыре (Lanciotti et al., 2005; Schmidt et al., 1993). В частности, Y. lipolytica является гораздо более липолитическим, чем D. hansenii и S. cerevisiae (Van den Tempel and Jakobsen, 2000). Из-за своей активности Y. lipolytica участвовал в созревании сыра или, наоборот, если зайти слишком далеко, в его порче. По этой причине он не используется в коммерческих целях. В некоторых сортах сыра, таких как Армада, интенсивный липолиз является результатом активности г.Candida (Boutrou, Guéguen, 2005). Липаза G. Candidum преимущественно высвобождает олеиновую кислоту из молочного жира (Gripon, 1993). Хотя вклад Penicillium , Staphylococcus и Corynebacterium spp. Поскольку липолиз в плесени, смазанном сыре и сыре с голубыми прожилками выше, чем у дрожжей, эта активность обычно используется в качестве критерия при выборе дрожжей поставщиками культур.

Липолиз — обзор | Темы ScienceDirect

Патофизиология

Первым шагом в метаболизме жирных кислот является липолиз в ответ на голодание, приводящий к циркуляции свободных жирных кислот (СЖК).Затем СЖК транспортируются через плазматическую мембрану с помощью специфических переносчиков СЖК и активируются с образованием эфиров кофермента А (КоА) в цитозоле ацил-КоА-синтетазами перед попаданием в митохондрии через карнитиновый цикл для дальнейшего метаболизма. ³ Длинноцепочечные эфиры ацил-КоА должны сначала быть конъюгированы с карнитином перед активным транспортом через митохондриальную мембрану и, попав в митохондрии, затем высвобождаются в виде сложных эфиров ацил-КоА в митохондриальном матриксе, где четырехступенчатый цикл β — происходит окисление.⁴ Карнитиновый цикл приводит к возвращению освобожденной карнитиновой части в цитоплазматический пул. Сам карнитин транспортируется в клетки специальным транспортером. ⁵ Примерно половина запасов карнитина в организме синтезируется эндогенно, а половина поступает с пищей. У беременных женщин и, следовательно, у новорожденных он, как правило, низкий, но в достаточном количестве содержится в грудном молоке и смесях для новорожденных, чтобы восполнить уровень у младенцев. Низкий уровень карнитина в крови означает повышенные потери, обычно с мочой.На каждом из этих этапов были обнаружены дефекты. ³

β-Окисление в митохондриальном матриксе — это четырехступенчатый циклический процесс, при котором жирные кислоты последовательно укорачиваются с высвобождением молекулы ацетил-КоА с каждым циклом. ⁶ Первые два цикла β-окисления длинноцепочечных жирных кислот происходят на внутренней митохондриальной мембране с использованием очень длинноцепочечной ацил-КоА дегидрогеназы (VLCAD) и ассоциированного митохондриального трифункционального белка (MTP). ⁷ Этот комплекс содержит три других фермента, необходимых для завершения цикла, включая длинноцепочечную 3-гидроксиацил-КоА дегидрогеназу (LCHAD).Восстанавливающие эквиваленты образуются в результате двух реакций ФАО, которые перемещаются в цепь переноса электронов флавопротеином (ETF) и его дегидрогеназой (ETFDH).

Среднецепочечные и короткоцепочечные жирные кислоты могут пересекать митохондриальную мембрану независимо от карнитина или длинноцепочечных транспортеров, что дает основание для использования среднецепочечных триглицеридов (MCT) при длинноцепочечных дефектах. Будь то пищевое происхождение или продукт β-окисления, они затем окисляются в митохондриальном матриксе ферментами, специфичными по длине.

В печени ацетил-КоА используется для производства кетоновых тел или в качестве субстрата для цикла трикарбоновой кислоты (ТСА). Как только происходит липолиз, должно происходить сопутствующее производство кетонов. Следовательно, обнаружение значительных свободных жирных кислот с непропорционально низким уровнем бутирата 3-ОН в контексте голодания является полезным диагностическим ключом. Дефекты на любом этапе пути ФАО приведут к локальному сбою выработки энергии, неадекватной выработке кетоновых тел и гипогликемии. Гипогликемия является результатом как снижения выработки глюкозы в печени в результате глюконеогенеза, так и увеличения периферического потребления.³ ^, ⁸ При нарушении β-окисления могут накапливаться аномальные и потенциально токсичные метаболиты.

В зависимости от места блокада различные ацилкарнитины будут накапливаться проксимально, и определение их структуры в крови и моче может помочь локализовать дефект. ⁹ Точно так же различные профили органических кислот в моче могут помочь охарактеризовать место блока. FFA может подвергаться ω-окислению в микросомах с образованием дикарбоновых кислот.Некоторые из этих метаболических признаков могут проявляться только во время метаболической нестабильности, тогда как при некоторых дефектах они могут быть стойкими.

Агонисты меланокортина стимулируют липолиз в эксплантатах жировой ткани человека, но не в адипоцитах | BMC Research Notes

Yaswen L, et al. Ожирение на мышиной модели дефицита проопиомеланокортина отвечает на периферический меланокортин. Nat Med. 1999; 5 (9): 1066–70.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Cheung CC, Клифтон, округ Колумбия, Штайнер, Р.А. Нейроны проопиомеланокортина являются прямыми мишенями для лептина в гипоталамусе. Эндокринология. 1997. 138 (10): 4489–92.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Mountjoy KG, et al. Локализация рецептора меланокортина-4 (MC4-R) в нейроэндокринных и вегетативных цепях управления в головном мозге. Мол Эндокринол. 1994. 8 (10): 1298–308.

CAS PubMed Google Scholar

Huszar D, et al. Целенаправленное нарушение рецептора меланокортина-4 приводит к ожирению у мышей. Клетка. 1997. 88 (1): 131–41.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Krude H, et al. Тяжелое раннее начало ожирения, надпочечниковая недостаточность и красная пигментация волос, вызванные мутациями POMC у людей. Нат Жене. 1998. 19 (2): 155–7.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Фаруки И.С. и др. Клинический спектр ожирения и мутаций в гене рецептора меланокортина 4. N Engl J Med. 2003. 348 (12): 1085–95.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Киши Т. и др. Экспрессия мРНК рецептора меланокортина 4 в центральной нервной системе крысы. J Comp Neurol. 2003. 457 (3): 213–35.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Williams DL, et al. Стимуляция рецептора меланокортина 3/4 ствола мозга увеличивает экспрессию гена несвязанного белка в буром жире. Эндокринология. 2003. 144 (11): 4692–7.

CAS Статья PubMed Google Scholar

Voss-Andreae A, et al. Роль центральной цепи меланокортина в адаптивном термогенезе коричневой жировой ткани. Эндокринология. 2007. 148 (4): 1550–60.

CAS Статья PubMed Google Scholar

10.

Song CK, et al. МРНК рецептора меланокортина-4 экспрессируется в нейронах оттока симпатической нервной системы в белую жировую ткань. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2005; 289 (5): R1467–76.

CAS Статья PubMed Google Scholar

11.

Brito MN, et al. Дифференциальная активация симпатической иннервации жировой ткани при стимуляции рецепторов меланокортина. Эндокринология. 2007. 148 (11): 5339–47.

CAS Статья PubMed Google Scholar

12.

Nogueiras R, et al. Центральная система меланокортина напрямую контролирует метаболизм периферических липидов. J Clin Invest. 2007. 117 (11): 3475–88.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google Scholar

13.

Rossi J, et al. Рецепторы меланокортина-4, экспрессируемые холинергическими нейронами, регулируют энергетический баланс и гомеостаз глюкозы. Cell Metab. 2011. 13 (2): 195–204.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google Scholar

14.

Лам Т.К. и др. Гипоталамическое зондирование циркулирующих жирных кислот необходимо для гомеостаза глюкозы. Nat Med. 2005. 11 (3): 320–7.

CAS Статья PubMed Google Scholar

15.

Obici S, et al. Центральные рецепторы меланокортина регулируют действие инсулина. J Clin Invest. 2001. 108 (7): 1079–85.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google Scholar

16.

Притчард Л. Е., Уайт А. Процессинг нейропептидов и его влияние на пути меланокортина. Эндокринология. 2007. 148 (9): 4201–7.

CAS Статья PubMed Google Scholar

17.

Конус РД. Анатомия и регуляция центральной меланокортиновой системы. Nat Neurosci. 2005. 8 (5): 571–8.

CAS Статья PubMed Google Scholar

18.

Roth CL, et al.Изменения периферического альфа-меланоцитстимулирующего гормона при детском ожирении. Обмен веществ. 2010. 59 (2): 186–94.

CAS Статья PubMed Google Scholar

19.

Mains RE, Eipper BA. Синтез и секреция кортикотропинов, меланотропинов и эндорфинов промежуточными клетками гипофиза крысы. J Biol Chem. 1979. 254 (16): 7885–94.

CAS PubMed Google Scholar

20.

Конус РД. Исследования физиологических функций меланокортиновой системы. Endocr Rev.2006; 27 (7): 736–49.

CAS Статья PubMed Google Scholar

21.

Wikberg JE, et al. Новые аспекты меланокортинов и их рецепторов. Pharmacol Res. 2000. 42 (5): 393–420.

CAS Статья PubMed Google Scholar

22.

Abdel-Malek Z, et al.Рецептор меланокортина-1 и пигментация человека. Ann N Y Acad Sci. 1999; 885: 117–33.

CAS Статья PubMed Google Scholar

23.

Baumann JB, et al. Стероидогенная активность сильнодействующих меланотропных пептидов в коре надпочечников крысы. Acta Endocrinol (Копен). 1986. 113 (3): 396–402.

CAS Google Scholar

24.

Smith SR, et al.Экспрессия агути в жировой ткани человека: функциональные последствия и повышенная экспрессия при диабете 2 типа. Сахарный диабет. 2003. 52 (12): 2914–22.

CAS Статья PubMed Google Scholar

25.

Voisey J, et al. Связанная с индексом массы тела экспрессия агути адипоцитов человека зависит от пола, но не от депо. Obes Res. 2002. 10 (6): 447–52.

Артикул PubMed Google Scholar

26.

Hoch M, et al. Экспрессия и локализация рецептора меланокортина-1 в жировой ткани человека у пациентов с тяжелым ожирением. Ожирение. 2007. 15 (1): 40–9.

CAS Статья PubMed Google Scholar

27.

Hoggard N, et al. Регулирование секреции лептина жировой тканью альфа-меланоцит-стимулирующим гормоном и родственным агути белком: еще одно свидетельство взаимодействия между лептином и сигнальной системой меланокортина.J Mol Endocrinol. 2004. 32 (1): 145–53.

CAS Статья PubMed Google Scholar

28.

Mountjoy KG. Функции пептидов на основе проопиомеланокортина при ожирении и диабете. Биохим Дж. 2010; 428 (3): 305–24.

CAS Статья PubMed Google Scholar

29.

Panaro BL, et al. Рецептор меланокортина-4 экспрессируется в энтероэндокринных L-клетках и регулирует высвобождение пептида YY и глюкагоноподобного пептида 1 in vivo.Cell Metab. 2014; 20 (6): 1018–29.

CAS Статья PubMed Google Scholar

30.

Беднарек М.А., et al. Сильные и селективные пептидные агонисты действия альфа-меланоцит-стимулирующего гормона (альфа-МСГ) на человеческий рецептор меланокортина 5; их синтез и биологическая оценка in vitro. Chem Biol Drug Des. 2007. 69 (5): 350–5.

CAS Статья PubMed Google Scholar

31.

Фатхи Z, Ибен LG, Паркер Э.М. Клонирование, экспрессия и тканевое распределение пятого подтипа рецептора меланокортина. Neurochem Res. 1995. 20 (1): 107–13.

CAS Статья PubMed Google Scholar

32.

van der Kraan M, et al. Экспрессия рецептора меланокортина-5 в секреторном эпителии поддерживает функциональную роль экзокринных и эндокринных желез. Эндокринология. 1998. 139 (5): 2348–55.

PubMed Google Scholar

33.

An JJ, et al. Периферический эффект альфа-меланоцит-стимулирующего гормона на окисление жирных кислот в скелетных мышцах. J Biol Chem. 2007. 282 (5): 2862–70.

CAS Статья PubMed Google Scholar

34.

Бостон, BA. Роль меланокортинов в функции адипоцитов. Ann N Y Acad Sci. 1999; 885: 75–84.

CAS Статья PubMed Google Scholar

35.

Moller CL, et al. Характеристика рецепторов меланокортина мышей, опосредующих липолиз адипоцитов, и исследование задействованных сигнальных путей. Mol Cell Endocrinol. 2011; 341 (1-2): 9-17.

CAS Статья PubMed Google Scholar

36.

Спировский М.З., и др. Влияние АКТГ на липолиз жировой ткани нормальных и адреналэктомированных крыс in vivo. Am J Physiol. 1975. 228 (2): 382–5.

CAS PubMed Google Scholar

37.

Бостон, BA, Cone RD. Характеристика экспрессии подтипа рецептора меланокортина в жировой ткани мышей и в клеточной линии 3T3-L1. Эндокринология. 1996. 137 (5): 2043–2050.

CAS PubMed Google Scholar

38.

Cho KJ, et al. Сигнальные пути, участвующие в индуцированном альфа-меланоцитами липолизе в адипоцитах 3T3-L1, стимулирующем гормон. J Cell Biochem. 2005. 96 (4): 869–78.

CAS Статья PubMed Google Scholar

39.

Richter WO, Schwandt P. Липолитическая активность пептидов проопиомеланокортикотропина in vitro. Нейропептиды. 1987. 9 (1): 59–74.

CAS Статья PubMed Google Scholar

40.

Chagnon YC, et al. Исследования связи и ассоциации между генами рецепторов меланокортина 4 и 5 и фенотипами, связанными с ожирением, в Квебекском семейном исследовании. Mol Med. 1997. 3 (10): 663–73.

PubMed Central CAS PubMed Google Scholar

41.

Чхаджлани В. Распределение кДНК подтипов рецепторов меланокортина в тканях человека. Biochem Mol Biol Int. 1996. 38 (1): 73–80.

CAS PubMed Google Scholar

42.

Pedersen SB, et al. Взаимосвязь между половыми гормонами, составом тела и параметрами метаболического риска у женщин в пременопаузе. Eur J Endocrinol. 1995. 133 (2): 200–6.

CAS Статья PubMed Google Scholar

43.

Conde-Frieboes K, et al. Идентификация и характеристика in vivo и in vitro аналогов альфа-меланоцитстимулирующего гормона (альфа-MSH) длительного действия и селективных аналогов рецептора меланокортина 4 (MC4-R). J Med Chem. 2012; 55 (5): 1969–77.

CAS Статья PubMed Google Scholar

44.

Gantz I, Fong TM. Система меланокортина. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2003; 284 (3): E468–74.

CAS Статья PubMed Google Scholar

45.

Haskell-Luevano C, et al. Биологическое и конформационное исследование стереохимических модификаций с использованием матричного пептида меланотропина Ac-Nle-c [Asp-His-Phe-Arg-Trp-Ala-Lys] -Nh3 на рецепторах меланокортина человека. J Med Chem. 1997. 40 (11): 1738–48.

CAS Статья PubMed Google Scholar

46.

Greenfield JR, et al. Модуляция артериального давления центральными меланокортинергическими путями. N Engl J Med. 2009. 360 (1): 44–52.

CAS Статья PubMed Google Scholar

47.

Grieco P, et al. Дизайн и синтез высокоэффективных и селективных аналогов меланотропина SHU9119, модифицированных в положении 6. Biochem Biophys Res Commun. 2002. 292 (4): 1075–80.

CAS Статья PubMed Google Scholar

48.

Shishioh-Ikejima N, et al. Повышение уровня альфа-меланоцит-стимулирующего гормона в плазме пациентов с синдромом хронической усталости.BMC Neurol. 2010; 10: 73.

PubMed Central Статья PubMed Google Scholar

49.

Rodrigues AR, Almeida H, Gouveia AM. Передача сигналов альфа-МСГ через рецептор меланокортина 5 способствует липолизу и ухудшает повторную этерификацию в адипоцитах. Biochim Biophys Acta. 2013; 1831 (7): 1267–75.

CAS Статья PubMed Google Scholar

50.

Wellhoner P, et al.Интраназальное введение агониста рецептора меланокортина 4 MSH / ACTH (4–10) у людей вызывает липолиз в белой жировой ткани. Int J Obes (Лондон). 2012. 36 (5): 703–8.

CAS Статья Google Scholar

51.

Kiwaki K, Levine JA. Дифференциальные эффекты адренокортикотропного гормона на жировую ткань человека и мыши. J. Comp Physiol B. 2003; 173 (8): 675–8.

CAS Статья PubMed Google Scholar

52.

Hoch M, et al. Слабое функциональное связывание рецептора меланокортина-1, экспрессируемого в адипоцитах человека. J Recept Signal Transduct Res. 2008. 28 (5): 485–504.

CAS Статья PubMed Google Scholar

53.

Xue B, et al. Продукт гена агути ингибирует липолиз в адипоцитах человека посредством Ca2 ⁺ -зависимого механизма. FASEB J. 1998; 12 (13): 1391–6.

CAS PubMed Google Scholar

54.

Чан Л.Ф. и др. MRAP и MRAP2 являются двунаправленными регуляторами семейства рецепторов меланокортина. Proc Natl Acad Sci USA. 2009. 106 (15): 6146–51.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google Scholar

55.

Manna SK, Aggarwal BB. Гормон, стимулирующий альфа-меланоциты, ингибирует активацию ядерного фактора транскрипции NF-каппа B, вызванную различными воспалительными агентами. J Immunol. 1998. 161 (6): 2873–80.

CAS PubMed Google Scholar

56.

Eves PC, Haycock JW. Механизмы передачи сигналов меланокортина. Adv Exp Med Biol. 2010; 681: 19–28.

CAS Статья PubMed Google Scholar

57.

Hoggard N, et al. Концентрации альфа-МСГ, AgRP и лептина в плазме у худых и полных мужчин и их связь с различными состояниями нарушения энергетического баланса. Клин Эндокринол (Oxf). 2004. 61 (1): 31–9.

CAS Статья Google Scholar

Генетические доказательства липолитического рисунка

Abstract

3-Йодтиронамин (T ₁ AM) представляет собой эндогенный биогенный амин, структурно связанный с гормоном щитовидной железы, который считается новым химическим посредником.Молекулярные механизмы, лежащие в основе эффектов T ₁ AM, не известны, но можно предвидеть изменения в экспрессии генов, поскольку сообщалось об отсроченных и длительных фенотипических эффектах, особенно в отношении модуляции липидного метаболизма и массы тела. Чтобы проверить эту гипотезу, мы проанализировали профили экспрессии генов в жировой ткани и печени восьми крыс, хронически получавших Т ₁ AM (10 мг / кг дважды в день в течение пяти дней), по сравнению с восемью необработанными крысами. In vivo T ₁ Введение AM вызывало значительные транскрипционные эффекты, поскольку 378 генов дифференциально экспрессировались в жировой ткани, а 114 — в печени. Ожидается, что указанные изменения в экспрессии генов будут стимулировать липолиз и бета-окисление, ингибируя при этом адипогенез. T ₁ AM также влиял на экспрессию нескольких генов, связанных с метаболизмом липопротеинов, предполагая, что он может играть важную роль в регуляции гомеостаза холестерина.Никакого влияния на экспрессию генов, связанных с токсичностью, не наблюдалось. Анализ ткани Т ₁ AM показал, что у обработанных животных его эндогенная концентрация увеличивалась примерно на один порядок без значительных изменений концентрации гормона щитовидной железы в тканях. Следовательно, наблюдаемые нами эффекты могут иметь физиологическое или патофизиологическое значение. Наши результаты составляют основу заявленной эффективности T ₁ AM в качестве липолитического агента и приобретают все большее значение с учетом возможного клинического использования T ₁ AM при ожирении и / или дислипидемии.

Образец цитирования: Мариотти В., Мелиссари Э., Иофрида К., Риги М., Ди Руссо М., Донзелли Р. и др. (2014) Модуляция экспрессии генов 3-йодтиронамином: генетические доказательства липолитической картины. PLoS ONE 9 (11): e106923. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0106923

Редактор: Габриэле Винченцо Нони, Университет Саленто, Италия

Поступило: 21 мая 2014 г .; Одобрена: 4 августа 2014 г .; Опубликовано: 7 ноября 2014 г.

Авторские права: © 2014 Mariotti et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Авторы подтверждают, что все данные, лежащие в основе выводов, полностью доступны без ограничений. Полную информацию об экспериментах с микрочипами можно получить из базы данных ArrayExpress в Европейском институте биоинформатики (EBI) (http: // www.ebi.ac.uk/arrayexpress/), используя следующие номера доступа: E-MTAB-2177 для подкожной жировой ткани и E-MTAB-2178 для печени.

Финансирование: У авторов нет поддержки или финансирования, чтобы сообщить.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Гормоны щитовидной железы (ТГ) контролируют развитие и метаболизм жировой ткани [1]. Они регулируют пролиферацию и дифференцировку адипоцитов [2], [3] и, поскольку они вызывают потерю веса за счет увеличения скорости метаболизма, могут быть показаны для лечения ожирения [4].Однако их использование ограничено, поскольку они вызывают тиреотоксические эффекты, включая кардиотоксические эффекты, такие как тахикардия и аритмия [4]. Таким образом, идентификация аналогов TH, которые сохраняют эффективность против ожирения с некоторыми нежелательными побочными эффектами, является важной целью исследования.

Недавно было показано, что некоторые производные TH обладают теми же полезными метаболическими эффектами, что и TH, но без отрицательных эффектов. В частности, биогенный амин 3-йодтиронамин (T ₁ AM) может влиять на метаболизм углеводов и липидов в дозах, которые не вызывают нежелательных побочных эффектов [5], [6].

Scanlan и его коллеги продемонстрировали, что T ₁ AM является эндогенным компонентом, который взаимодействует со специфическими рецепторами (отличными от ядерных рецепторов тироидных гормонов) и производит значительные функциональные эффекты, предполагая, что его следует рассматривать как новый химический мессенджер [7] . Используя анализ, основанный на высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (HPLC-MS / MS), T ₁ AM был обнаружен в сыворотке и тканях крыс, а также в крови человека и джунгарского хомяка [6], [8 ], [9].Количественный анализ его физиологической концентрации показал, что содержание Т ₁ AM в органах выше, чем в крови, что позволяет предположить, что некоторые ткани способны его накапливать [8].

Путь эндогенного биосинтеза Т ₁ AM до сих пор неизвестен. Было высказано предположение, что AM T ₁ происходит из TH через декарбоксилирование и дейодирование [7], но йодтиронин-декарбоксилирующий фермент еще не идентифицирован [10].

Физиологическая роль T ₁ AM все еще исследуется, и после введения T ₁ AM наблюдались различные эффекты.У грызунов внутрибрюшинные инъекции Т ₁ AM вызывают брадикардию, гипотермию, гипергликемию, снижение скорости метаболизма ( V O ₂), снижение респираторного фактора (RQ), кетонурию и потерю жировой массы [6], [7], [11]. Снижение RQ указывает на то, что использование углеводов подавляется в ответ на T ₁ AM и что потребности в энергии покрываются за счет потребления липидов, и этот вывод был недавно подтвержден метаболомическим анализом и оценкой изотопного отношения углерода [12].Примечательно, что в дозах, использованных в последнем исследовании, не было обнаружено влияния на термогенез или сердечную функцию.

T ₁ AM может также оказывать влияние на центральную нервную систему. Имеются данные о двухфазном воздействии на прием пищи [13], и метаболические эффекты, описанные выше, могут быть опосредованы, по крайней мере частично, изменениями секреции инсулина и / или глюкагона, которые наблюдались после i.c.v. администрация [14], [15]. Кроме того, недавно было высказано предположение, что T ₁ AM может иметь эффекты, способствующие обучению [16].

Молекулярные мишени T ₁ AM в настоящее время неизвестны. T ₁ AM, как было обнаружено, регулирует синтез цАМФ посредством взаимодействия с G-белком, связанным с следовым амино-ассоциированным рецептором 1 (TAAR1) и, возможно, с другими рецепторами этого класса [7], [11], [17] . Снид и его коллеги сообщили о регуляции мембранных транспортеров, таких как везикулярный транспортер моноаминов (VMAT2), с помощью T ₁ AM, подтверждая нейромодулирующую роль T ₁ AM [18].Предполагается, что взаимодействие с адренергическим рецептором α _2A (Adra _2A) происходит в бета-клетках поджелудочной железы [11].

До сих пор неизвестно, влияет ли T ₁ AM на экспрессию генов. Таким образом, цель нашего исследования состояла в том, чтобы обеспечить всестороннее понимание транскрипционной активности T ₁ AM с использованием технологии микрочипов у крыс, хронически получавших T ₁ AM, по сравнению с крысами, не получавшими лечения. Поскольку влияние T ₁ AM на метаболизм жирных кислот, по-видимому, превышает все другие эффекты (брадикардия, гипергликемия, гипотермия и гипометаболизм), мы решили исследовать экспрессию генов в печени и жировой ткани и обсудили наши результаты с особым учетом их потенциальные последствия для метаболизма липидов.

Материалы и методы

Животные и Т

₁ Обработка AM

В качестве животных использовали самцов крыс линии Вистар. Перед проведением каких-либо экспериментальных манипуляций крыс в течение одной недели акклиматизировали в животноводческом помещении нашего отделения.

Проект был одобрен комитетом по уходу за животными и их использованию Пизанского университета. Восемь крыс с массой тела 100–125 г обрабатывали Т ₁ AM путем внутрибрюшинной инъекции 10 мг / кг дважды в день в течение пяти дней.Восемь контрольных крыс получали бесплатные внутрибрюшинные инъекции Т ₁ AM в параллельных условиях содержания. Затем крыс умерщвляли гильотиной, подкожную жировую ткань и печень немедленно удаляли, мгновенно замораживали и хранили при -80 ° C до их использования.

T ₁ AM было любезно предоставлено профессором Томасом Сканланом, Орегонский университет здравоохранения и науки.

Анализ Т

₁ AM

T ₁ AM анализировали в образцах печени и жировой ткани с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (МС-МС).Образцы печени (50–200 мг) гомогенизировали на льду в 1,5 мл фосфатного буфера (154 мМ NaCl, 6,7 мМ NaH ₂ PO ₄, pH 7,4) за 15 + 15 проходов в гомогенизаторе Potter-Elvejheim. Гомогенат центрифугировали в течение 10 мин при 18620 × g, осадок отбрасывали и супернатант помещали в центрифужную пробирку на 15 мл. После встряхивания добавляли 60 мг NaCl; смесь уравновешивали при комнатной температуре в течение одного часа, а затем депротеинизировали 2 мл ацетона на ледяной бане в течение 30 минут.После центрифугирования при 720 × g в течение 15 мин супернатант упаривали до 1 мл с использованием Concentrator Plus (Eppendorf, Гамбург, Германия), поддерживаемого при 30 ° C. Последующие этапы включали твердофазную экстракцию, разделение ВЭЖХ и анализ МС-МС, которые выполняли, как описано ранее [8].

Жировая ткань (100–250 мг) экстрагировалась в течение 30 мин в 1 мл ацетонитрила и 0,1 М HCl (85–15, об. / Об.) В ультразвуковой ванне (LBS1 3Lt, Falc Instruments, Treviglio, Италия). Материал разбавляли ацетонитрилом до 2 мл и гомогенизировали за 12 + 12 проходов в гомогенизаторе Potter-Elvejheim.Гомогенат дополнительно обрабатывали ультразвуком в течение 10 мин, встряхивали в течение 1 мин и центрифугировали при 720 × g в течение 15 мин. Супернатант трижды подвергали экстракции жидкость / жидкость 1 мл гексана: верхнюю фазу (гексан) отбрасывали, а нижнюю фазу (ацетонитрил) в конечном итоге сушили в слабом потоке азота. Высушенные образцы восстанавливали с помощью 0,1 М HCl / метанола (50-50 об. / Об.) И подвергали разделению ВЭЖХ и анализу МС-МС, как описано ранее [8].

Выделение, амплификация и мечение РНК

Суммарную РНК

выделяли из жировой ткани и печени с помощью набора RNeasy Lipid Tissue Mini (Qiagen, Валенсия, Калифорния, США) и набора RNeasy Microarray Tissue Mini (Qiagen, Валенсия, Калифорния, США) соответственно.

Остаточную ДНК удаляли расщеплением ДНКазой на колонке с использованием набора ДНКаз, не содержащего РНКаз (Qiagen, Валенсия, Калифорния, США).

Количество и чистоту общей РНК измеряли по УФ-поглощению при 260 нм и соотношению 260/280, соответственно, с использованием спектрофотометра NanoDrop ND-1000 (NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, USA). Все РНК имели отношение оптической плотности 260/280 ≥1,9.

Целостность РНК

проверяли с помощью биоанализатора Agilent 2100 (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США) с использованием набора Agilent RNA 6000 Nano (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США).Все РНК отображали число целостности РНК (RIN) ≥8.

Один микрограмм общей РНК от обработанных и контрольных животных амплифицировали и метили красителями Cyanine 5 (Cy5) или Cyanine 3 (Cy3) (Agilent Technologies, PaloAlto, CA, USA) с помощью набора для маркировки Quick-Amp (Agilent Technologies, Palo). Альто, Калифорния, США). Для мониторинга экспериментов от амплификации и маркировки образцов до гибридизации микрочипов к каждому образцу РНК добавляли Spike-In РНК (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США).

Скорости включения красителя Cy3 и Cy5 измеряли по УФ-поглощению при 555 нм и 647 нм соответственно. Оба флуорофора показали сравнимую эффективность включения в диапазоне от 11 до 15 пмоль красителя на мкг амплифицированной РНК.

Гибридизация микрочипов

Гибридизационная смесь, содержащая 825 нг амплифицированной РНК, меченной Cy3 (соответствует 9–10 пмоль красителя Cy3), 825 нг меченной Cy5 амплифицированной РНК (соответствует 11–12 пмоль красителя Cy5), 11 мкл 10X Blocking Agent. , 2.2 мкл 25-кратного буфера для фрагментации и 55 мкл 2-кратного буфера для гибридизации GE (последние три из набора для гибридизации экспрессии генов плюс, Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США) гибридизировали с олиго-микрочипами целого генома крысы 4x44K G4131F (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США). Каждый слайд содержит 4 набора с 44000 60-мерных олигонуклеотидных зондов, представляющих 41012 уникальных зондов.

Гибридизацию матрицы

проводили при 65 ° C в печи Agilent G2545A (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США) в течение 17 часов при постоянном вращении.После гибридизации матрицы промывали в соответствии с протоколом Quick Amp Labeling (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США). Чтобы предотвратить опосредованную озоном деградацию флуоресцентного сигнала, матрицы погружали в раствор ацетонитрила (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) на 10 секунд и последовательно в раствор для стабилизации и сушки (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США). ) на 30 сек. Эти две последние стирки проводились при комнатной температуре.

Экспериментальный дизайн микроматрицы

Сбалансированный блочный дизайн применялся отдельно для образцов жировой и печеночной ткани: на каждом массиве были гибридизированы два по-разному помеченных образца из обработанной и контрольной групп, всего восемь массивов (рис. 1).

Сбор и анализ данных с микрочипов

изображений микрочипов были получены с помощью сканера Agilent G2565BA (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США) с разрешением 5 мкм, а необработанные данные об интенсивности были извлечены с помощью программного обеспечения Feature Extraction V10.5 (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния, США). .

Предварительная обработка данных и статистический анализ выполнялись с помощью пакета LIMMA (LInear Model of Microarray Analysis) [19]. Контроль качества исходных данных проводился в соответствии с руководящими принципами проекта MAQC (MicroArray Quality Control) [20].Исходные данные интенсивности были вычтены из фона методом normexp и нормализованы внутри массивов методом LOESS и между массивами методом шкалы .

Байесовская умеренная t-статистика [21] использовалась для проведения статистического анализа, и только гены с скорректированным значением p по Бенджамини и Хохбергу [22] <0,05 считались дифференциально выраженными.

GeneCards (http://www.genecards.org) [23], Onto-Express (http: // vortex.cs.wayne.edu/ontoexpress/) [24], [25] и Инструменты биоинформатики COREMINE (http://www.coremine.com/medical/) были адаптированы для построения сетей взаимодействия между дифференциально экспрессируемыми генами и провести точную проверку соответствующих научных данных.

Проверка данных микрочипов методом RT-qPCR

Те же образцы РНК, которые использовались в экспериментах с микрочипами, использовали для проведения экспериментов RT-qPCR. Суммарные РНК подвергали обратной транскрипции с помощью случайных праймеров и праймеров oligo-dT с помощью набора для обратной транскрипции QuantiTect (Qiagen, Валенсия, Калифорния, США).Праймеры для ПЦР были разработаны с помощью программного обеспечения Beacon Designer 4.0 (Premier Biosoft International, Пало-Альто, Калифорния, США) и синтезированы Sigma-Aldrich (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США). Последовательности праймеров перечислены в таблице 1.

RT-qPCR выполняли на приборе iCycler iQ (Biorad, Hercules, CA, USA) с использованием iQ SYBR Green Supermix (Biorad, Hercules, CA, USA). Протокол амплификации: 3 мин при 95 ° C (активация ДНК-полимеразы), затем 40 циклов при 95 ° C в течение 30 секунд (этап денатурации), 58–62 ° C (в зависимости от Tm праймера) в течение 60 секунд (этап отжига). и 72 ° C в течение 30 секунд (шаг продления).После этого для построения кривой плавления использовали постепенное повышение температуры от 55 ° C до 95 ° C со скоростью 0,5 ° C / 10 с. Для каждой пары праймеров эффективность амплификации проверяли с использованием пяти серийных разведений кДНК, проведенных в двух экземплярах. Чтобы уменьшить влияние биологической вариации на эффективность амплификации, использовали образец кДНК, полученный путем объединения РНК из всех восьми контрольных образцов. Для всех пар праймеров эффективность амплификации составляла от 90 до 110%, а R ² был> 0.99. Стабильность шести генов домашнего хозяйства (Mapk6, Kdm2b, Psmd4, Cypa, B2mg, Bact) оценивалась с помощью программного обеспечения geNorm [26], см. Таблицу 1. geNorm идентифицировал три гена домашнего хозяйства как стабильные, которые использовались для нормализации значений экспрессии. из генов-мишеней: гены Psmd4, Cypa и B2mg в жировой ткани и гены Bact, Kdm2b и B2mg в печени.

Каждый образец анализировали в трех повторностях для расчета стандартного отклонения (SD) для трех экспериментальных повторностей. Только эксперименты с SD <0.Было рассмотрено 4 повтора для каждой группы. Относительные уровни экспрессии генов-мишеней в T ₁ AM, обработанных по сравнению с T ₁ AM, необработанных тканей рассчитывали методом geNorm и сообщали как кратное увеличение или уменьшение.

Одно- и двусторонние знаковые ранговые тесты Вилкоксона в версии Манна-Уитни были применены для оценки статистической значимости результатов RT-qPCR с использованием порогового значения p <0,05.

Результаты

Ткань T

₁ Концентрация AM

Chronic T ₁ AM не оказало заметного влияния на поведение животных.В контрольной группе концентрация T1AM составляла в среднем 5,38 ± 1,30 пмоль / г в печени и 0,36 ± 0,07 пмоль / г в жировой ткани. После 5 дней введения экзогенного Т ₁ AM (10 мг / кг дважды в день) концентрация в печени увеличилась до 288,04 ± 22,91 пмоль / г, а концентрация жировой ткани увеличилась до 8,35 ± 2,45 пмоль / г (P <0,01 в обоих случаях. ).

Хотя обработка тканей не была оптимизирована для анализа Т3 и Т4, эти вещества также были идентифицированы в образцах печени с помощью ВЭЖХ / МС-МС [8], и у обработанных животных не наблюдалось значительной разницы, хотя наблюдалась тенденция к снижению Т3 ( 15.92 ± 2,14 против 17,98 ± 1,13 пмоль / г) и повышение T4 (194,14 ± 13,24 против 155,68 ± 14,22 пмоль / г).

Результаты микрочипов

T ₁ AM хроническое введение влияло на экспрессию большего числа генов в подкожной жировой ткани крыс, чем в печени. В частности, 378 генов по-разному экспрессировались в жировой ткани, 268 активировались и 110 подавлялись, в то время как в печени дифференциально экспрессировались 114 генов, 63 гены с повышенной и 51 подавляющей регуляции (см. Таблицы S1 и S2).Полную информацию об экспериментах с микрочипами и их результатах можно получить из базы данных ArrayExpress в Европейском институте биоинформатики (EBI) (http://www.ebi.ac.uk/arrayexpress/), используя следующие номера доступа: E-MTAB-2177 для подкожной жировой ткани и E-MTAB-2178 для печени.

Для выявления групп генов, участвующих в клеточных процессах, которые могут объяснить наблюдаемые фенотипические эффекты T ₁ AM, два списка дифференциально экспрессируемых генов были исследованы с использованием инструментов Onto-Express , GeneCard и COREMINE биоинформатических инструментов и путем тщательного просмотра научной литературы.В подкожной жировой ткани были идентифицированы 19 генов, участвующих в функциях липопротеидов, липолизе, бета-окислении и адипогенезе (таблица 2), тогда как в печени семь генов, участвующих в метаболизме липидов (таблица 3), оказались наиболее значимыми.

Результаты RT-qPCR

Для проверки результатов микроматрицы были отобраны пять дифференциально экспрессируемых генов для подкожной жировой ткани: Scarb1, Acsl5, Apod, Igfbp2 и Cebpb и семь для печени: Gk, Me1, Thrsp, Ldlrap 1, Insig2, Dbp и Tef.

Все эти гены были выбраны на основе их значений p и их биологической значимости для объяснения молекулярных механизмов действия T1AM.

В жировой ткани дифференциальная экспрессия была подтверждена для Igfbp2, Acsl5, Scarb1, Apod и Cebpb, хотя Cebpb не достиг статистической значимости

В печени была подтверждена дифференциальная экспрессия всех тестируемых генов (рисунок 2).

Рисунок 2. Изменения в экспрессии генов, подтвержденные микрочипами, были подтверждены с помощью RT-qPCR для четырех из пяти генов, протестированных в подкожной жировой ткани (дифференциальная экспрессия Cebpb не была статистически значимой) и для всех семи генов, протестированных в печени. .

Данные представлены как: кратное изменение log2 ± SE; *: p≤0,05.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0106923.g002

Обсуждение

T ₁ AM считается новым химическим мессенджером, способным вызывать множество функциональных эффектов, но лежащие в основе молекулярные механизмы до конца не изучены. В частности, до сих пор неизвестно, может ли T ₁ AM модулировать экспрессию генов, хотя это кажется вероятной возможностью, поскольку некоторые эффекты являются длительными, и это относится, в частности, к модуляции метаболизма жирных кислот [6].

Чтобы исследовать молекулярные механизмы, лежащие в основе эффектов T ₁ AM, профили экспрессии генов были проанализированы в подкожной жировой ткани и в печени восьми крыс, хронически получавших T ₁ AM, по сравнению с восемью необработанными крысами. Эти ткани были выбраны из-за их центральной роли в регуляции энергетического гомеостаза и метаболизма липидов / углеводов [27], [28].

Длительное введение T ₁ AM влияло на экспрессию гораздо большего числа генов в подкожной жировой ткани крыс, чем в печени, что свидетельствует о большей чувствительности к T ₁ AM жировой ткани по сравнению с печенью.Примечательно, что анализ ткани T ₁ AM показал, что в нашей экспериментальной модели эндогенная концентрация увеличилась примерно на один порядок величины (в 20 раз в жировой ткани и в 50 раз в печени) без значительных изменений концентрации гормона щитовидной железы в тканях. Следовательно, наблюдаемые нами эффекты могут иметь физиологическое или патофизиологическое значение.

Наше исследование не может предоставить прямую механистическую информацию о модуляции липидного обмена с помощью T ₁ AM, поскольку показатели липидного обмена не были определены.Кроме того, исследования доза-эффект не проводились, и вводилась только разовая доза в течение относительно короткого периода времени. Однако некоторые из наблюдаемых изменений в экспрессии генов согласуются с ответами, о которых сообщалось в предыдущих исследованиях, и заслуживают особого обсуждения их потенциальных функциональных последствий. Мы также сравниваем транскрипционный ответ на T ₁ AM с известными геномными эффектами гормона щитовидной железы.

Влияние Т

₁ AM на подкожную жировую ткань

Среди 378 генов, дифференциально экспрессируемых в подкожной жировой ткани, 19 генов, по-видимому, играют важную роль в молекулярных механизмах, связанных с метаболическими эффектами (таблица 2).

T

₁ AM активирует гены, связанные с функцией липопротеинов.

Липопротеины предназначены для транспортировки липидов, которые нерастворимы в крови, в системе кровообращения. Большая часть холестерина адипоцитов происходит из циркулирующих липопротеинов [29]. De novo Фактически, синтез холестерина в жировой ткани является низким, как это наблюдалось в ранних исследованиях, в которых сообщалось, что скорость синтеза холестерина в жировых клетках составляет всего 4% от скорости синтеза в печени [30].

Некоторые гены, регулируемые T ₁ AM, связаны с функцией липопротеинов, и пять из них представляют особый интерес: Ldlrap1 (адаптерный белок рецептора липопротеинов низкой плотности 1), Lrp10 (белок, связанный с рецептором липопротеинов низкой плотности10) , Apod (аполипопротеин D), Scarb1 (рецептор скавенджера класса B, член 1) и Sirt6 (сиртуин [гомолог регуляции 2 информации о тихом спаривании] 6).

Продукт Ldlrap1 представляет собой адаптерный белок, необходимый для эффективного эндоцитоза рецептора липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), который играет решающую роль в удалении циркулирующих ЛПНП (липопротеинов низкой плотности) [31]. Белок, кодируемый этим геном, стабилизирует ассоциацию между LDLR и LDL и способствует интернализации комплекса LDL-LDLR [31]. Изменения связи между ЛПНП и ЛПНП препятствуют эндоцитозу комплекса и приводят к накоплению ЛПНП в плазме.

Lrp10 принадлежит к семейству ЛПНП, и его продукт опосредует клеточное поглощение богатых холестерином остатков ЛПОНП (липопротеинов очень низкой плотности) in vitro [32]. Sugiyama с коллегами продемонстрировали, что Lrp10 посредством взаимодействия с apoE, который в изобилии присутствует в остатках VLDL, участвует в их клиренсе из крови [32]. Lrp10 также является молекулярной мишенью Ginko Biloba, который, как известно, обладает эффектом снижения уровня холестерина [33].

Apod представляет собой аполипопротеин, структурно подобный белкам семейства липокалинов, который отвечает за транспорт липидов.Снижение экспрессии Apod изменяет метаболизм липидов [34]. Plasma Apod — это компонент HDL (липопротеинов высокой плотности), участвующих в «обратном транспорте холестерина», посредством которого холестерин переносится из периферических тканей в печень для выведения с желчью [35]. Apod модулирует активность лецитин: холестерин-ацилтрансферазы (LCAT), связанного с ЛПВП фермента, который катализирует превращение свободного холестерина в ХЭ, который затем рекрутируется в ядро ЛПВП. Повышенная этерификация холестерина с помощью LCAT наблюдается в присутствии Apod, а образование комплекса Apod-LCAT оказывает стабилизирующее действие на LCAT [36].Усиливая этерификацию холестерина посредством LCAT, Apod косвенно способствует обратному транспорту холестерина [37]. Более того, была идентифицирована ковалентная перекрестная связь между Apod и Apoa-II, структурным компонентом HDL [38].

Ген Scarb1 кодирует трансмембранный рецептор ЛПВП, который опосредует перенос CE из плазменных HDL в ткани без деградации частиц HDL (селективное поглощение CE) [39]. Взаимодействие HDL-Scarb1 вызывает образование гидрофобного канала, по которому HDL разгружает CE.Истощенные холестерином ЛПВП отделяются от рецептора и повторно попадают в кровоток, чтобы захватить другие молекулы периферического холестерина [40].

Поскольку Scarb1 регулирует уровни холестерина ЛПВП, его снижение было связано с повышенной восприимчивостью к атеросклерозу: мыши Scarb1 KO показали повышенный холестерин ЛПВП и снижение селективного клиренса холестерина ЛПВП [41], [42]. Кроме того, нарушение гена Scarb1 у атеросклеротических мышей (APOE ^—/^—) ускоряет наступление атеросклероза [43].

Sirt6 кодирует члена семейства сиртуинов, который обладает активностью NAD-зависимой деацетилазы и ADP-рибозилтрансферазы [44] — [46]. Недавно было обнаружено, что трансгенные мыши, сверхэкспрессирующие Sirt6 и получавшие пищу с высоким содержанием жиров, накапливают значительно меньше холестерина ЛПНП по сравнению с их однопометниками дикого типа [47].

Итак, T ₁ AM, модулируя экспрессию генов, связанных с функцией липопротеинов, потенциально влияет на гомеостаз холестерина.Эта гипотеза подтверждается активацией другого гена, Osbpl5 (оксистерин-связывающий белок-подобный 5), который кодирует член семейства оксистерин-связывающих белков (OSBP), который контролирует активность оксистерина [48]. Оксистерины, оксигенированные производные холестерина, являются особенно мощными ингибиторами биосинтеза холестерина [49]. Следовательно, исследования, специально нацеленные на оценку влияния хронического введения T1AM на гомеостаз холестерина, могут быть уместными.

T

₁ AM регулирует гены, связанные с липолизом и бета-окислением.

Липолиз гидролизует триглицериды и высвобождает глицерин и свободные жирные кислоты. Некоторые гены, связанные с липолизом, такие как Adra2c (адренергический, альфа-2C-, рецептор) и G0s2 (((G (0) / G (1) переключающий ген 2)), подавляются с помощью T ₁ AM. .

Adra2c является мишенью катехоламинов, которые являются важными регуляторами липолиза жировых клеток [50]. Устойчивая мобилизация липидов и увеличение расхода энергии наблюдались при введении антагониста альфа2-адренорецепторов собакам и людям [51], [52].

Белок G0s2 отрицательно регулирует активность липазы триглицеридов жиров (ATGL), которая катализирует первую стадию гидролиза триглицеридов. Белок G0s2 непосредственно связывается с ATGL и снижает липолиз, опосредованный ATGL, путем ингибирования его гидролазной активности [53]. В клетках Hela сверхэкспрессия G0S2 предотвращает опосредованную ATGL деградацию липидных капель, а также базальную и стимулирует липолиз в культивируемых адипоцитах, тогда как подавление эндогенного G0S2 усиливает липолиз адипоцитов [53].

T ₁ AM активирует экспрессию генов, связанных с бета-окислением, в частности, Acsl5 (длинноцепочечный член семейства ацил-CoA синтетазы 5) и Pex5 (фактор 5 пероксисомального биогенеза).

В цитоплазме свободные жирные кислоты превращаются в тиоэфиры ацил-КоА с помощью ацил-КоА синтетаз (ACS). Затем они направлены на синтез липидов de novo для хранения энергии или на бета-окисление как в митохондриях, так и в пероксисомах с образованием АТФ [54].Длинноцепочечные ACS (ACSL) действуют на жирные кислоты, содержащие 12–22 атома углерода [55]. Acsl5 — единственная изоформа ACSL, которая, как известно, расположена на внешней мембране митохондрий, и она, вероятно, играет важную роль в бета-окислении жирных кислот [56]. В поддержку этой гипотезы наблюдалось увеличение белка и мРНК Acsl5 после голодания [57]. Более того, Acsl1 и Acsl4, но не Acsl5, ингибируются Triascin C [58], который блокирует синтез триглицеридов de novo [59], указывая тем самым, что Acsl5 не участвует в синтезе триглицеридов.

Ген Pex5 кодирует белок, участвующий в биогенезе пероксисом, которые представляют собой органеллы, в которых жирные кислоты с очень длинной цепью проходят начальные стадии бета-окисления [60], [61]. Эти данные предполагают, что T ₁ AM способствует как липолизу триглицеридов, так и бета-окислению, в соответствии с повышенной утилизацией липидов, что наблюдалось в различных экспериментальных моделях [6], [12].

T

₁ AM регулирует экспрессию генов, связанных с адипогенезом.

Количество жира в организме зависит от размера и количества адипоцитов. Помимо зрелых адипоцитов, жировая ткань содержит мультипотентные мезенхимные клетки и преадипоциты, способные пролиферировать после определенных стимулов [62]. Если потребление пищи превышает потребление энергии, зрелые адипоциты претерпевают гипертрофию (увеличение в размере) и гиперплазию (увеличение количества) [62]. Последний, также известный как адипогенез, основан на привлечении, пролиферации и дифференцировке преадипоцитов [63].

Несколько факторов транскрипции, включая членов семейства C / EBP, индуцируются во время дифференцировки адипоцитов и играют важную роль в регуляции экспрессии генов адипоцитов [64]. Cebpb , подавляемый T ₁ AM, является первым игроком в адипогенезе, ответственным за активацию C / EBPalfa и PPARgamma [64], [65].

На экспрессию гена

адипоцитов также влияют сигнальные преобразователи и активаторы транскрипции (STAT) [66]. Stat5b , активируемый T ₁ AM, активируется на ранней фазе процесса дифференцировки и является положительным регулятором пролиферации [67]. Однако постоянная и чрезмерная активация Stat5b становится ингибитором адипогенеза [65].

Другие гены, регулируемые T ₁ AM, в том числе Pmp22 (периферический миелиновый белок 22), Sirt2 (сиртуин [регулятор информации о тихом спаривании 2, гомолог] 2), Nolc1 (фосфопротеин ядрышка и спиралевидного тела 1 ) и Igfbp2 (белок 2, связывающий инсулиноподобный фактор роста, 36 кДа), участвуют в адипогенезе.

Pmp22 , активируемый T ₁ AM, принадлежит к семейству генов, специфичных для остановки роста (GAS).Гены этого семейства регулируют рост клеток, блокируя митотическое деление в ответ на внеклеточные сигналы [68]. У мышей 3T3-L1 во время пре-адипоцитов происходит активация генов GAS, а ген Pmp22 оказывает ингибирующее действие на адипогенез [69].

Sirt2 , повышенное регулирование T ₁ AM, коды для члена семейства сиртуинов. В преадипоцитах 3T3-L1 мышей сверхэкспрессия Sirt2 ингибирует дифференцировку адипоцитов [70], тогда как подавление Sirt2 способствует адипогенезу [70].Sirt2 подавляет адипогенез путем деацетилирования FOXO1, который связывает PPARgamma и подавляет его транскрипционную активность [70].

Nolc1 , пониженная регуляция T ₁ AM, кодирует члена семейства ретинобластомы. Эти белки фосфорилируются циклинами, что способствует пролиферации клеток в различных клетках [71]. В жировой ткани пролиферация клеток стимулируется FGF10 посредством активации пути Ras / Map с последующим циклин D2-зависимым фосфорилированием NOLC1 [72].

Igfbp2 , подавляемый T ₁ AM, кодирует член семейства IGF-связывающих белков, который изолирует IGFs во внеклеточной среде и ограничивает их доступ к сигнальным рецепторам [73]. В частности, Igfbp2 ингибирует взаимодействие IGF1-IGF1R, секвестрируя IGF1 [73], который является индуктором преадипоцитной дифференцировки [74]. Неизвестно, оказывает ли Igfbp2 ингибирующий эффект на дифференцировку преадипоцитов за счет секвестрирования IGF1 [73], но недавно было обнаружено, что мыши со сверхэкспрессией Igfbp2 обнаруживают повышенную жировую массу [75].Эти данные поднимают гипотезу о том, что T ₁ AM контролирует рост жировой ткани, ингибируя адипогенез.

С другой стороны, повышающая регуляция гена Dmpk (dystrophia myotonica-протеинкиназа) может снижать гипертрофию адипоцитов. Этот ген кодирует серин / треониновую протеинкиназу, дефицит которой, по-видимому, является фактором риска ожирения. Мыши Dmpk KO, получавшие диету с высоким содержанием жиров, демонстрируют повышенную массу тела и жировую массу из-за гипертрофии адипоцитов [76].

Наконец, учитывая, что расширение жировой ткани требует образования новых сосудов, [77] — [79] регуляция генов, связанных с ангиогенезом, таких как Paqr3 (член семейства рецепторов прогестина и adipoQ III) и Pla2g2a (фосфолипаза A2, тромбоциты группы IIA, синовиальная жидкость) может представлять собой дополнительный молекулярный механизм, с помощью которого T ₁ AM ингибирует адипогенез.

Ген Paqr3 , активируемый T ₁ AM, кодирует рецептор адипонектина [80], который, как сообщается, ингибирует ангиогенез путем подавления передачи сигналов VEGF [81].

Ген Pla2g2a , подавляемый T ₁ AM, кодирует фосфолипазу, которая катализирует sn-2-ацилгидролиз фосфолипидов. Было показано, что ингибирование Pla2g2a снижает образование капиллярных трубок [82].

Влияние T

₁ AM на печень

Хотя 114 генов экспрессировались по-разному, не наблюдалось значительного влияния на транскрипцию генов токсичности, что согласуется с наблюдаемой высокой переносимостью введения Т ₁ AM.Однако этот вывод нуждается в подтверждении дальнейшими исследованиями, поскольку наше расследование охватывало ограниченный период времени. Кроме того, поскольку было затронуто большое количество генов, требуется специальный анализ, чтобы исключить токсические эффекты, возникающие в результате взаимодействия между продуктами генов Анализ экспрессии генов, однако, выявил потенциальное влияние T ₁ AM на метаболизм липидов в печени, так как семь были идентифицированы гены, связанные с метаболизмом липидов: Ldlrap 1 (адаптерный белок рецептора липопротеинов низкой плотности 1), Insig2 (индуцированный инсулином ген 2), Thrsp (чувствительный к тироидным гормонам), Gk (глицеринкиназа), Me1 (яблочный фермент 1, НАДФ (+) — зависимый, цитозольный), Dbp (D-сайт связывающего белка промотора альбумина (D-бокса альбумина)) и Tef (тиреотрофный эмбриональный фактор).

Ldlrap 1 , активируемый T ₁ AM как в печени, так и в жировой ткани, необходим для эффективного эндоцитоза рецепторов LDL / LDL в гепатоцитах [83]. Insig2 с пониженной регуляцией способен снижать липогенез путем ингибирования белков, связывающих регуляторные элементы стерола (SREBP) [84]. Thrsp , активируемый T ₁ AM, а также гормонами щитовидной железы, является положительным регулятором липогенеза [85]. Дифференциальная экспрессия Ldlrap1, Insig2 и Thrsp предполагает повышенную интернализацию и накопление липидов из-за введения AM T ₁.С другой стороны, Gk и Me1 , ключевые ферменты биосинтеза триглицеридов и жирных кислот [86] — [88], оба были подавлены T ₁ AM.

Наконец, в печени T ₁ AM, по-видимому, влияет на циркадный ритм метаболизма липидов, положительно регулируя экспрессию двух выходных медиаторов циркадных часов, Dbp и Tef . Оба белка, входящие в подсемейство факторов транскрипции PAR (пролин и богатые кислотами аминокислот), вносят вклад в циркадную транскрипцию генов, кодирующих тиоэстеразы ацил-КоА, что приводит к циклическому высвобождению жирных кислот из тиоэфиров.В свою очередь, жирные кислоты действуют как лиганды для PPARα (рецепторы, активируемые пролифератором пероксисом α), которые стимулируют транскрипцию генов, кодирующих белки, участвующие в поглощении и / или метаболизме липидов и холестерина [89].

В любом случае необходимы дальнейшие исследования, чтобы лучше понять влияние T1AM на метаболизм липидов в печени.

Транскрипционные эффекты Т

₁ AM по сравнению с гормоном щитовидной железы

Стимуляция катаболизма липидов также рассматривается как эффект гормона щитовидной железы [90].Сравнение транскрипционного ответа на T ₁ AM и геномных эффектов T ₃ и других гормонов, полученное из литературных данных, показано в таблице 4. Для многих важнейших мишеней T ₁ AM значительного эффекта не наблюдается. сообщалось о гормоне щитовидной железы. Еще более интересно то, что транскрипция Cebpb, GK и Me1 ингибировалась T ₁ AM, тогда как сообщалось об обратном эффекте как для T ₃, так и для инсулина. Следовательно, T ₁ AM, по-видимому, определяет значительные геномные эффекты, которые не воспроизводятся гормоном щитовидной железы.Поскольку вероятно, хотя формально это еще не продемонстрировано, что T ₁ AM синтезируется из T ₃, было бы интересно исследовать, могут ли некоторые из метаболических эффектов, обычно приписываемых последнему, действительно опосредованы T _1. AM.

Таблица 4. Сравнение транскрипционного ответа на T ₁ AM с известными геномными эффектами гормона щитовидной железы, инсулина и кортизола (повышенная регуляция = ↑, пониженная регуляция = ↓, не регулируемая или данные отсутствуют = -).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0106923.t004

Выводы

In vivo T ₁ Введение AM вызывает значительные транскрипционные эффекты, более очевидные в жировой ткани, чем в печени, что может способствовать увеличению липидного обмена и снижению жировой массы. Таким образом, мы предполагаем, что транскрипционные эффекты могут служить основанием для заявленной эффективности T ₁ AM в качестве липолитического агента и приобретают важность с учетом возможного клинического использования T ₁ AM, поскольку не влияет на экспрессию связанных генов. к токсичности не наблюдалось до сих пор.

Кроме того, T ₁ AM влияет на экспрессию нескольких генов, относящихся к метаболизму липопротеинов, предполагая, что механизмы, опосредованные T ₁ AM, также могут играть важную роль в регуляции гомеостаза холестерина.

Насколько нам известно, это первое исследование экспрессии генов в ответ на введение T ₁ AM. Дальнейшее исследование in vitro и in vivo Требуется функциональных исследований, чтобы подтвердить наши наблюдения и понять его молекулярный механизм.T ₁ AM, как известно, взаимодействует с высоким сродством с TAAR1, рецептором, связанным с G-белком, но предполагаемый путь трансдукции, ведущий к модуляции экспрессии гена, неизвестен. Хотя T ₁ AM не активирует ядерные рецепторы тироидных гормонов [7], не исключено, что могут существовать дополнительные мишени.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: RZ SP VM EM. Проведены эксперименты: ВМ ЦИ МР РД АС СФ ГК. Проанализированы данные: EM MD.Написал статью: В.М. СП РЗ.

Список литературы

1. Viguerie N, Millet L, Avizou S, Vidal H, Larrouy D и др. (2002) Регулирование экспрессии гена адипоцитов человека гормоном щитовидной железы. J Clin Endocrinol Metab 87: 630–634.
2. Хаунер Х., Энтенманн Дж., Вабитч М., Гайяр Д., Айлхауд Дж. И др. (1989) Стимулирующий эффект глюкокортикоидов на дифференциацию клеток-предшественников адипоцитов человека, культивируемых в среде определенного химического состава. Дж. Клин Инвест 84: 1663–1670.
3. Darimont C, Gaillard D, Ailhaud G, Negrel R (1993) Терминальная дифференцировка клеток преадипоцитов мыши: адипогенная и антимитогенная роль трийодтиронина. Эндокринол клеток Mol 98: 67–73.
4. Кроткевский М. (2002) Гормоны щитовидной железы в патогенезе и лечении ожирения. Eur J Pharmacol 440: 85–98.
5. Кьеллини Дж., Фраскарелли С., Гелардони С., Карничелли В., Тобиас С. К. и др. (2007) Сердечные эффекты 3-йодтиронамина: новая аминергическая система, модулирующая сердечную функцию.FASEB J 21: 1597–1608.
6. Braulke LJ, Klingenspor M, DeBarber A, Tobias SC, Grandy DK, et al. (2008) 3-Йодтиронамин: новый гормон, контролирующий баланс между использованием глюкозы и липидов. J Comp Physiol B 178: 167–177.
7. Сканлан Т.С., Сухленд К.Л., Харт М.Э., Кьеллини Дж., Хуанг И и др. (2004) 3-Йодтиронамин — это эндогенное быстродействующее производное гормона щитовидной железы. Nat Med 10: 638–642.
8. Саба А., Кьеллини Дж., Фраскарелли С., Маркини М., Гелардони С. и др.(2010) Тканевое распределение и метаболизм 3-йодтиронамина в сердце. Эндокринология 151: 5063–5073.
9. Галли Е., Маркини М., Саба А., Берти С., Тонакчера М. и др. (2012) Обнаружение 3-йодтиронамина у людей: предварительное исследование. J Clin Endocrinol Metab 97: E69–74.
10. Wu SY, Green WL, Huang WS, Hays MT, Chopra IJ (2005) Альтернативные пути метаболизма гормонов щитовидной железы. Щитовидная железа 15: 943–958.
11. С уважением, JB, Kataoka H, Cano DA, Camerer E, Yin L и др.(2007) Исследование специфичных для типа клеток функций Gi in vivo позволяет идентифицировать регуляторы секреции инсулина GPCR. Дж. Клин Инвест 117: 4034–4043.
12. Хэвиленд Дж. А., Рейланд Х., Бутц Д. Е., Тонелли М., Портер В. П. и др. (2013) Метаболомика и исследования дыхания на основе ЯМР показывают катаболизм липидов и белков при хроническом лечении низкими дозами T (1) AM. Ожирение (Серебряная весна) 21: 2538–2544.
13. Дилло В.С., Бьюик Г.А., Уайт Н.Э., Гардинер СП, Томпсон Э.Л. и др. (2009) Производное гормона щитовидной железы 3-йодтиронамин увеличивает потребление пищи грызунами.Диабет, ожирение, метаболизм 11: 251–260.
14. Кливерик Л.П., Фоппен Э., Акерманс М.Т., Серли М.Дж., Зауэрвайн HP и др. (2009) Центральные эффекты тиронаминов на метаболизм глюкозы у крыс. J Endocrinol 201: 377–386.
15. Манни М.Э., Де Сиена Дж., Саба А., Марчини М., Дицембрини И. и др. (2012) 3-Йодтиронамин: модулятор осей гипоталамус-поджелудочная железа-щитовидная железа у мышей. Br J Pharmacol 166: 650–658.
16. Манни М.Э., Де Сиена Дж., Саба А., Марчини М., Ландуччи Е. и др.(2013) Фармакологические эффекты 3-йодтиронамина (T1AM) у мышей включают облегчение приобретения и сохранения памяти и снижение болевого порога. Br J Pharmacol 168: 354–362.
17. Zucchi R, Chiellini G, Scanlan TS, Grandy DK (2006) Следы амино-связанных рецепторов и их лигандов. Br J Pharmacol 149: 967–978.
18. Снид А.Н., Сантос М.С., Сил Р.П., Миякава М., Эдвардс Р.Х. и др. (2007) Тиронамины ингибируют плазматическую мембрану и транспорт везикулярных моноаминов.ACS Chem Biol 2: 390–398.
19. Smyth G (2005) Limma: линейные модели для данных микрочипов. В: Джентльмен Р., Кэри В., Дудуа С., Иризарри Р., Хубер В., редакторы. Решения для биоинформатики и вычислительной биологии с использованием R и Bioconductor. Springer, Нью-Йорк :. С. 397–420.
20. Паттерсон Т.А., Лобенхофер Е.К., Фулмер-Сментек С.Б., Коллинз П.Дж., Чу Т.М. и др. (2006) Сравнение производительности одноцветных и двухцветных платформ в рамках проекта MicroArray Quality Control (MAQC).Nat Biotechnol 24: 1140–1150.
21. Смит Г.К. (2004) Линейные модели и эмпирические байесовские методы для оценки дифференциальной экспрессии в экспериментах с микрочипами. Stat Appl Genet Mol Biol 3: Статья3.
22. Benjamini Y, Hochberg Y (1995) Контроль ложного обнаружения: практичный и мощный подход к множественному тестированию. J Roy Stat Soc Ser B (Meth) 57: 289–300.
23. Сафран М., Чалифа-Каспи В., Шмуэли О., Олендер Т., Лапидот М. и др.(2003) Геноцентрические базы данных человека в Научном институте Вейцмана: GeneCards, UDB, CroW 21 и HORDE. Nucleic Acids Res 31: 142–146.
24. Драгичи С., Хатри П., Бхавсар П., Шах А., Кравец С.А. и др. (2003) Onto-Tools, инструментарий современного биолога: Onto-Express, Onto-Compare, Onto-Design и Onto-Translate. Nucleic Acids Res 31: 3775–3781.
25. Khatri P, Draghici S, Ostermeier GC, Krawetz SA (2002) Профилирование экспрессии генов с использованием онтэкспресса.Геномика 79: 266–270.
26. Вандесомпеле Дж., Де Претер К., Паттин Ф., Поппе Б., Ван Рой Н. и др. (2002) Точная нормализация количественных данных ОТ-ПЦР в реальном времени путем геометрического усреднения нескольких генов внутреннего контроля. Genome Biol 3: RESEARCH0034.
27. Postic C, Dentin R, Girard J (2004) Роль печени в контроле углеводного и липидного гомеостаза. Метаболизм диабета 30: 398–408.
28. Гавел П.Дж. (2004) Обновленная информация о гормонах адипоцитов: регулирование энергетического баланса и углеводного / липидного обмена.Диабет 53 Приложение 1: S143–151.
29. Ю. Б. Л., Чжао С. П., Ху Дж. Р. (2010) Дисбаланс холестерина в адипоцитах: возможный механизм дисфункции адипоцитов при ожирении. Obes Rev 11: 560–567.
30. Кованен П.Т., Никкиля Е.А., Миеттинен Т.А. (1975) Регулирование синтеза и хранения холестерина в жировых клетках. J. Lipid Res. 16: 211–223.
31. Michaely P, Li W, Anderson R, Cohen J, Hobbs H (2004) Модульный адаптерный белок ARH необходим для связывания и интернализации липопротеинов низкой плотности (LDL), но не для кластеризации рецепторов LDL в покрытых ямках.J Biol Chem 279: 34023–34031.
32. Сугияма Т., Кумагаи Х., Морикава Ю., Вада Ю., Сугияма А. и др. (2000) Новый белок, связанный с рецепторами липопротеинов низкой плотности, опосредующий клеточное поглощение аполипопротеином Е бета-ЛПОНП in vitro. Биохимия 39: 15817–15825.
33. Xie Z, Wu X, Zhuang C, Chen F, Wang Z и др. (2009) [Защитное действие экстракта гинкго билоба на морфологию и функцию ганглиозных клеток сетчатки после перерезки зрительного нерва у морских свинок].Чжун Си И Цзе Хэ Сюэ Бао 7: 940–946.
34. Perdomo G, Henry Dong H (2009) Аполипопротеин D в метаболизме липидов и его функциональное значение при атеросклерозе и старении. Старение (Олбани, штат Нью-Йорк) 1: 17–27.
35. Mahley RW, Innerarity TL, Rall SC, Weisgraber KH (1984) Липопротеины плазмы: структура и функция аполипопротеинов. Журнал липидов 25: 1277–1294.
36. Steyrer E, Kostner GM (1988) Активация лецитин-холестерин-ацилтрансферазы аполипопротеином D: сравнение протеолипосом, содержащих аполипопротеин D, A-I или C-I.Biochim Biophys Acta 958: 484–491.
37. Rassart E, Bedirian A, Do Carmo S, Guinard O, Sirois J, et al. (2000) Аполипопротеин D. Biochim Biophys Acta. 1482: 185–198.
38. Blanco-Vaca F, Via DP, Yang CY, Massey JB, Pownall HJ (1992) Характеристика связанных дисульфидными связями гетеродимеров, содержащих аполипопротеин D, в липопротеинах плазмы человека. J. Lipid Res. 33: 1785–1796.
39. Acton S, Rigotti A, Landschulz KT, Xu S, Hobbs HH и др.(1996) Идентификация рецептора скавенджера SR-BI как рецептора липопротеинов высокой плотности. Наука 271: 518–520.
40. Trigatti B, Rigotti A, Krieger M (2000) Роль рецептора липопротеинов высокой плотности SR-BI в метаболизме холестерина. Curr Opin Lipidol 11: 123–131.
41. Риготти А., Тригатти Б.Л., Пенман М., Рейберн Х., Херц Дж. И др. (1997) Нацеленная мутация в мышином гене, кодирующем рецептор липопротеинов высокой плотности (HDL), скавенджер рецептора класса B типа I, показывает его ключевую роль в метаболизме HDL.Proc Natl Acad Sci U S A 94: 12610–12615.
42. Out R, Hoekstra M, Spijkers JA, Kruijt JK, van Eck M и др. (2004) Рецептор скавенджера класса B типа I несет единоличную ответственность за избирательное поглощение сложных эфиров холестерина из ЛПВП печенью и надпочечниками у мышей. Журнал липидов 45: 2088-2095.
43. Тригатти Б., Рейберн Х., Виньялс М., Браун А., Миеттинен Х. и др. (1999) Влияние рецептора липопротеинов высокой плотности SR-BI на репродуктивную и сердечно-сосудистую патофизиологию.Proc Natl Acad Sci U S A 96: 9322–9327.
44. Blander G, Guarente L (2004) Семейство протеин-деацетилаз Sir2. Анну Рев Биохим 73: 417–435.
45. Haigis MC, Guarente LP (2006) Сиртуины млекопитающих — новые роли в физиологии, старении и ограничении калорий. Genes Dev 20: 2913–2921.
46. Лист G, Ford E, Kurtev M, Guarente L (2005) Гомолог Sir2 мыши SIRT6 представляет собой ядерную ADP-рибозилтрансферазу. J Biol Chem 280: 21313–21320.
47. Канфи Й., Пешти В., Гил Р., Найман С., Наум Л. и др. (2010) SIRT6 защищает от патологических повреждений, вызванных ожирением, вызванным диетой. Ячейка старения 9: 162–173.
48. Beh CT, Cool L, Phillips J, Rine J (2001) Перекрывающиеся функции гомологов дрожжевых оксистерин-связывающих белков. Генетика 157: 1117–1140.
49. Gill S, Chow R, Brown AJ (2008) Стерольные регуляторы гомеостаза холестерина и за его пределами: пересмотренная и пересмотренная гипотеза оксистерина.Prog Lipid Res 47: 391-404.
50. Langin D (2006) Липолиз жировой ткани как метаболический путь для определения фармакологических стратегий против ожирения и метаболического синдрома. Pharmacol Res 53: 482–491.
51. Лафонтан М., Берлан М. (1995) Альфа-2-адренорецепторы жировых клеток: регуляция функции жировых клеток и липолиза. Endocr Rev 16: 716–738.
52. Berlan M, Montastruc JL, Lafontan M (1992) Фармакологические перспективы терапии антагонистами альфа-2-адренорецепторов.Тенденции Pharmacol Sci 13: 277–282.
53. Ян X, Лу X, Lombès M, Rha GB, Chi YI и др. (2010) Ген 2 переключателя G (0) / G (1) регулирует липолиз жировой ткани посредством ассоциации с липазой триглицерида жировой ткани. Cell Metab 11: 194–205.
54. Achouri Y, Hegarty BD, Allanic D, Bécard D, Hainault I и др. (2005) Экспрессия длинноцепочечной жирной ацил-КоА-синтетазы 5 индуцируется инсулином и глюкозой: участие белка-1c, связывающего регуляторный элемент стерола. Биохимия 87: 1149–1155.
55. Ли Л. (2006) Функции крысиных ацил-КоА синтетаз в бактериях и клетках млекопитающих: Университет Северной Каролины.
56. Coleman RA, Lewin TM, Van Horn CG, Gonzalez-Baró MR (2002) Регулируют ли длинноцепочечные ацил-CoA синтетазы поступление жирных кислот в синтетические пути или пути разложения? J Nutr 132: 2123–2126.
57. Lewin TM, Kim JH, Granger DA, Vance JE, Coleman RA (2001) Изоформы 1, 4 и 5 ацил-CoA синтетазы присутствуют в различных субклеточных мембранах в печени крысы и могут ингибироваться независимо.J Biol Chem 276: 24674–24679.
58. Kim JH, Lewin TM, Coleman RA (2001) Экспрессия и характеристика рекомбинантных ацил-CoA синтетаз 1, 4 и 5 крысы. Селективное ингибирование триаксином C и тиазолидиндионами. J Biol Chem 276: 24667–24673.
59. Igal RA, Wang P, Coleman RA (1997) Триаксин C блокирует de novo синтез глицеролипидов и сложных эфиров холестерина, но не рециркулирует жирную кислоту в фосфолипид: доказательства функционально отдельных пулов ацил-КоА.Biochem J 324 (Pt 2): 529–534.
60. Варанаси Ю., Чу Р., Хуанг К., Кастельон Р., Елданди А. В. и др. (1996) Идентификация элемента, чувствительного к пролифератору пероксисом, перед геном оксидазы пероксисомального жирного ацил-кофермента А человека. J Biol Chem 271: 2147–2155.
61. Mannaerts GP, Van Veldhoven PP, Casteels M (2000) Пероксисомная деградация липидов через бета- и альфа-окисление у млекопитающих. Cell Biochem Biophys 32 Весна: 73–87.
62. Бон Г.Б. (2008) [Жировая ткань: многофункциональный орган].G Ital Cardiol (Рим) 9: 23С – 28С.
63. Хаусман Д.Б., ДиГироламо М., Бартнесс Т.Дж., Хаусман Г.Дж., Мартин Р.Дж. (2001) Биология пролиферации белых адипоцитов. Obes Rev 2: 239–254.
64. Розен Э.Д., Хсу Ч., Ван Х, Сакаи С., Фриман М. В. и др. (2002) C / EBPalpha индуцирует адипогенез через PPARgamma: единый путь. Гены Дев 16: 22–26.
65. Miyaoka Y, Tanaka M, Naiki T, Miyajima A (2006) Онкостатин M ингибирует адипогенез через сигнальные пути RAS / ERK и STAT5.J Biol Chem 281: 37913–37920.
66. White UA, Stephens JM (2010) Транскрипционные факторы, которые способствуют образованию белой жировой ткани. Эндокринол клеток Mol 318: 10–14.
67. Нанбу-Вакао Р., Морикава Ю., Мацумура И., Масухо Ю., Мурамацу М.А. и др. (2002) Стимуляция адипогенеза 3T3-L1 с помощью сигнального преобразователя и активатора транскрипции 5. Mol Endocrinol 16: 1565–1576.
68. Schneider C, King RM, Philipson L (1988) Гены, специфически экспрессируемые при остановке роста клеток млекопитающих.Cell 54: 787–793.
69. Shugart EC, Levenson AS, Constance CM, Umek RM (1995) Дифференциальная экспрессия генов gas и gadd в различных точках остановки роста во время развития адипоцитов. Разница в росте клеток 6: 1541–1547.
70. Jing E, Gesta S, Kahn CR (2007) SIRT2 регулирует дифференцировку адипоцитов посредством ацетилирования / деацетилирования FoxO1. Cell Metab 6: 105–114.
71. Клаудио П.П., Тонини Т., Джордано А. (2002) Семья ретинобластомы: близнецы или дальние родственники? Genome Biol 3: отзывы 3012.
72. Кониси М., Асаки Т., Койке Н., Мива Х., Мияке А. и др. (2006) Роль Fgf10 в пролиферации клеток белой жировой ткани. Mol Cell Endocrinol 249: 71–77.
73. Baxter RC, Twigg SM (2009) Действия белков, связывающих IGF и родственных белков в жировой ткани. Тенденции метаболизма эндокринола 20: 499–505.
74. MacDougald OA, Lane MD (1995) Транскрипционная регуляция экспрессии генов во время дифференцировки адипоцитов. Анну Рев Биохим 64: 345–373.
75. Rehfeldt C, Renne U, Sawitzky M, Binder G, Hoeflich A (2010) Увеличение жировой массы, уменьшение размера миофибрилл и переход к метаболизму гликолитических мышц у трансгенных мышей-самцов-подростков, сверхэкспрессирующих IGFBP-2. Am J Physiol Endocrinol Metab 299: E287–298.
76. Llagostera E, Carmona MC, Vicente M, Escorihuela RM, Kaliman P (2009) Диета с высоким содержанием жиров вызвала ожирение и резистентность к инсулину у мышей, лишенных протеинкиназы миотонической дистрофии. FEBS Lett 583: 2121–2125.
77. Christiaens V, Lijnen HR (2010) Ангиогенез и развитие жировой ткани. Эндокринол клеток Mol 318: 2–9.
78. Рупник М.А., Паниграхи Д., Чжан С.Й., Даллабрида С.М., Лоуэлл Б.Б. и др. (2002) Масса жировой ткани может регулироваться сосудистой сетью. Proc Natl Acad Sci U S A 99: 10730–10735.
79. Hausman GJ, Richardson RL (2004) Ангиогенез жировой ткани. J Anim Sci 82: 925–934.
80. Garitaonandia I, Smith JL, Kupchak BR, Lyons TJ (2009) Адипонектин, идентифицированный как агонист PAQR3 / RKTG с использованием системы анализа на основе дрожжей.J Recept Signal Transduct Res 29: 67–73.
81. Чжан И, Цзян Х, Цинь Икс, Е Д, Йи З и др. (2010) RKTG ингибирует ангиогенез путем подавления MAPK-опосредованной аутокринной передачи сигналов VEGF и подавляется при светлоклеточном почечно-клеточном раке. Онкоген 29: 5404–5415.
82. Чен В., Ли Л., Чжу Дж., Лю Дж., Сориа Дж. И др. (2004) Контроль ангиогенеза с помощью ингибитора фосфолипазы А2. Chin Med Sci J 19: 6–12.
83. Сириниан М.И., Беллеуди Ф., Кампанья Ф., Серидоно М., Гарофало Т. и др.(2005) Адаптерный белок ARH рекрутируется на плазматическую мембрану за счет связывания липопротеинов низкой плотности (LDL) и модулирует эндоцитоз рецепторного комплекса LDL / LDL в гепатоцитах. J Biol Chem 280: 38416–38423.
84. Takaishi K, Duplomb L, Wang MY, Li J, Unger RH (2004) Сверхэкспрессия печеночного insig-1 или -2 снижает липогенез у тучных крыс с диабетом Цукера и у нормальных крыс, голодных / питающихся. Proc Natl Acad Sci U S A 101: 7106–7111.
85. LaFave LT, Augustin LB, Mariash CN (2006) S14: идеи, полученные от мышей с нокаутом.Эндокринология 147: 4044–4047.
86. Магнусон М.А., Никодем В.М. (1983) Молекулярное клонирование последовательности кДНК для яблочного фермента крысы. Прямые доказательства индукции in vivo мРНК яблочного фермента печени крысы гормоном щитовидной железы. J Biol Chem 258: 12712–12717.
87. Wise EM, Ball EG (1964) Яблочный фермент и липогенез. Proc Natl Acad Sci U S A 52: 1255–1263.
88. Bublitz C, Kennedy EP (1954) Синтез фосфатидов в изолированных митохондриях.III. Ферментативное фосфорилирование глицерина. J Biol Chem 211: 951–961.
89. Gachon F, Leuenberger N, Claudel T., Gos P, Jouffe C. и др. (2011) Основные белки лейциновой молнии, богатые пролином и кислотными аминокислотами, модулируют активность рецептора альфа, активируемого пролифератором пероксисом (PPARalpha). Proc Natl Acad Sci U S A 108: 4794–4799.
90. Пуччи Э., Чиовато Л., Пинчера А (2000) Щитовидная железа и метаболизм липидов. Int J Obes Relat Metab Disord 24 Suppl 2: S109–112.
91. Bujalska IJ, Quinkler M, Tomlinson JW, Montague CT, Smith DM, et al. (2006) Профили экспрессии 11-бета-гидроксистероид дегидрогеназы типа 1 и генов-мишеней глюкокортикоидов в подкожных и сальниковых преадипоцитах человека. J Mol Endocrinol 37: 327–340.
92. Нильсен Т.С., Кампманн Ю., Нильсен Р.Р., Йессен Н., Орсков Л. и др. (2012) Снижение экспрессии мРНК и белка перилипина A и гена переключения G0 / G1 2 (G0S2) в жировой ткани человека при плохо контролируемом диабете 2 типа.J Clin Endocrinol Metab 97: E1348–1352.
93. Menéndez-Hurtado A, Vega-Núñez E, Santos A, Perez-Castillo A (1997) Регулирование тироидным гормоном и ретиноевой кислотой генов альфа- и бета-связывающего белка CCAAT / энхансера во время развития печени. Biochem Biophys Res Commun 234: 605–610.
94. Сато Й., Нишио Й., Секин О, Кодама К., Нагаи Й. и др. (2007) Повышенная экспрессия генов CCAAT / связывающих энхансер белков-бета и -дельта и генов хемоаттрактантного белка-1 моноцитов в аортах крыс с гиперинсулинемией.Диабетология 50: 481–489.
95. Pereira RC, Durant D, Canalis E (2000) Транскрипционная регуляция фактора роста соединительной ткани кортизолом в остеобластах. Am J Physiol Endocrinol Metab 279: E570–576.
96. Sharma P, Thakran S, Deng X, Elam MB, Park EA (2013) Ядерные корепрессоры опосредуют репрессию транскрипции гена группы IIa фосфолипазы A2 гормоном щитовидной железы. J Biol Chem 288: 16321–16333.
97. Narkewicz MR, Iynedjian PB, Ferre P, Girard J (1990) Инсулин и трийодтиронин индуцируют мРНК глюкокиназы в первичных культурах гепатоцитов новорожденных крыс.Biochem J 271: 585–589.
98. Ван З., Ивасаки Ю., Чжао Л. Ф., Нишияма М., Тагучи Т. и др. (2009) Гормональная регуляция гена гликолитического фермента и транскрипция гена киназы / фосфатазы пируватдегидрогеназы. Endocr J 56: 1019–1030.
99. Кацурада А., Иритани Н., Фукуда Х, Ногучи Т., Танака Т. (1988) Транскрипционная и посттранскрипционная регуляция синтеза яблочного фермента инсулином и трийодтиронином. Biochim Biophys Acta 950: 113–117.
100.Мариаш CN, Jump DB, Oppenheimer JH (1984) T3 стимулирует синтез специфической мРНК в первичной культуре гепатоцитов. Biochem Biophys Res Commun 123: 1122–1129.
101. Jump DB, Bell A, Lepar G, Hu D (1990) Инсулин быстро индуцирует транскрипцию гена S14 печени крысы. Мол эндокринол 4: 1655–1660.
102. Фернандес-Альварес A, Соледад Альварес M, Cucarella C, Casado M (2010) Характеристика промотора человеческого инсулино-индуцированного гена 2 (INSIG2): роль Ets-связывающих мотивов.J Biol Chem 285: 11765–11774.

% PDF-1.7 % 477 0 объект > эндобдж xref 477 150 0000000015 00000 н. 0000003342 00000 п. 0000003569 00000 н. 0000003614 00000 н. 0000003703 00000 п. 0000003792 00000 н. 0000003881 00000 н. 0000003970 00000 н. 0000004060 00000 н. 0000004149 00000 п. 0000004238 00000 п. 0000004328 00000 п. 0000004417 00000 н. 0000004506 00000 н. 0000004596 00000 н. 0000004685 00000 н. 0000004774 00000 н. 0000004863 00000 н. 0000004952 00000 н. 0000005001 00000 н. 0000005090 00000 н. 0000005177 00000 н. 0000005265 00000 н. 0000005353 00000 п. 0000005442 00000 н. 0000005530 00000 н. 0000005619 00000 п. 0000005707 00000 н. 0000005796 00000 н. 0000005884 00000 н. 0000005973 00000 п. 0000006061 00000 н. 0000006149 00000 н. 0000006238 00000 п. 0000006326 00000 н. 0000006414 00000 н. 0000006503 00000 н. 0000006592 00000 н. 0000006682 00000 п. 0000007335 00000 н. 0000007911 00000 п. 0000008061 00000 н. 0000008225 00000 н. 0000008378 00000 н. 0000008532 00000 н. 0000008684 00000 н. 0000008837 00000 н. 0000008990 00000 н. 0000009143 00000 п. 0000009297 00000 н. 0000009451 00000 п. 0000009605 00000 н. 0000009759 00000 п. 0000009913 00000 н. 0000010067 00000 п. 0000010221 00000 п. 0000010375 00000 п. 0000010526 00000 п. 0000010678 00000 п. 0000010827 00000 п. 0000010974 00000 п. 0000011111 00000 п. 0000011261 00000 п. 0000011411 00000 п. 0000013683 00000 п. 0000015879 00000 п. 0000018221 00000 п. 0000020309 00000 п. 0000022770 00000 п. 0000025211 00000 п. 0000027766 00000 н. 0000029821 00000 п. 0000029963 00000 н. 0000030084 00000 п. 0000030168 00000 п. 0000030232 00000 п. 0000030316 00000 п. 0000030408 00000 п. 0000030472 00000 п. 0000030508 00000 п. 0000030639 00000 п. 0000030688 00000 п. 0000030724 00000 п. 0000030773 00000 п. 0000030961 00000 п. 0000031199 00000 п. 0000031569 00000 п. 0000031714 00000 п. 0000031755 00000 п. 0000031907 00000 п. 0000060627 00000 п. 0000148370 00000 н. 0000148437 00000 н. 0000148653 00000 н. 0000148940 00000 н. 0000149172 00000 н. 0000149439 00000 н. 0000149991 00000 н. 0000175226 00000 н. 0000175491 00000 н. 0000175797 00000 н. 0000177559 00000 н. 0000179687 00000 н. 0000179781 00000 н. 0000180561 00000 п. 0000181019 00000 н. 0000181716 00000 н. 0000181910 00000 н. 0000182108 00000 н. 0000182512 00000 н. 0000183112 00000 н. 0000183201 00000 н. 0000183434 00000 н. 0000183739 00000 н. 0000184186 00000 н. 0000184264 00000 н. 0000184488 00000 н. 0000184784 00000 н. 0000184866 00000 н. 0000185096 00000 н. 0000185397 00000 н. 0000185724 00000 н. 0000196367 00000 н. 0000196719 00000 н. 0000205545 00000 н. 0000206129 00000 н. 0000206947 00000 н. 0000212001 00000 н. 0000212063 00000 н. 0000212677 00000 н. 0000212818 00000 н. 0000212943 00000 н. 0000213172 00000 н. 0000213387 00000 н. 0000213520 00000 н. 0000213661 00000 н. 0000213834 00000 н. 0000213997 00000 н. 0000214212 00000 н. 0000214391 00000 н. 0000214640 00000 н. 0000214837 00000 п. 0000214984 00000 п. 0000215215 00000 н. 0000215378 00000 н. 0000215541 00000 н. 0000215872 00000 н. 0000216047 00000 н. 0000216230 00000 н. 0000216401 00000 н. трейлер] >> startxref 0 %% EOF 478 0 объект > эндобдж 479 0 объект > эндобдж 480 0 объект > эндобдж 481 0 объект > эндобдж 482 0 объект > эндобдж 483 0 объект > эндобдж 484 0 объект > эндобдж 485 0 объект > эндобдж 486 0 объект > эндобдж 487 0 объект > эндобдж 488 0 объект > эндобдж 489 0 объект > эндобдж 490 0 объект > эндобдж 491 0 объект > эндобдж 492 0 объект > эндобдж 493 0 объект > эндобдж 494 0 объект > эндобдж 495 0 объект >> эндобдж 496 0 объект > эндобдж 497 0 объект > эндобдж 498 0 объект > эндобдж 499 0 объект > эндобдж 500 0 объект > эндобдж 501 0 объект > эндобдж 502 0 объект > эндобдж 503 0 объект > эндобдж 504 0 объект > эндобдж 505 0 объект > эндобдж 506 0 объект > эндобдж 507 0 объект > эндобдж 508 0 объект > эндобдж 509 0 объект > эндобдж 510 0 объект > эндобдж 511 0 объект > эндобдж 512 0 объект > эндобдж 513 0 объект > эндобдж 514 0 объект > эндобдж 515 0 объект > поток xc«g`D

Медицинский совет штата Орегон: Мезотерапия и инъекционный липолиз: Изложение философии: штат Орегон

Предпосылки

Лечение, наиболее правильное название которого «инъекционный липолиз», обычно ассоциируется с термином «мезотерапия». уменьшить или устранить нежелательные локальные скопления жира.Различные термины для лечения, призванного «растворять» жир, по-видимому, используются как синонимы, хотя «мезотерапия» получила известность в общественном языке.

Инъекционный липолиз обычно проводится с использованием продуктов торговых марок, таких как Lipodissolve ™ и Lipostabil ™, или патентованных составов, поставляемых в аптеках. Одним из общих ингредиентов всех препаратов для инъекционного липолиза является фосфатидилхолин (PPC).

В США дезоксихолат натрия (DC), входящий в состав желчи, является вторым основным ингредиентом, который используется для сохранения растворимости PPC в инъекционной форме без осаждения из раствора.

Фосфатидилхолин (PPC) и дезоксихолат натрия (DC) являются фосфолипидами, эмульгаторами и поверхностно-активными веществами. БПК является наиболее распространенным фосфолипидным компонентом клеточных мембран, предшественником ацетилхолина и компонентом липопротеинов. DC является составной частью желчи. Оба вещества естественным образом присутствуют в организме человека.

В отличие от инъекций в мезодерму, инъекционный липолиз доставляется в подкожно-жировую клетчатку. В обоих случаях глубина инъекции имеет решающее значение для предотвращения повреждения фасции.Было высказано предположение, что лечение PPC и DC уменьшает подкожный жир за счет некроза адипоцитов из-за прямого токсического или поверхностно-активного воздействия.

Фосфатидилхолин (PPC) и дезоксихолат натрия (DC) одобрены Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США (FDA) для использования в качестве поверхностно-активных веществ и носителей лекарств, среди прочего, но ни один из них не одобрен для подкожной инъекции. Lipodissolve ™ и Lipostabil ™ не одобрены FDA.

Запатентованные составы PPC / DC и других лекарств были произведены в аптеках-компаундах, однако такие составы не стандартизированы с точки зрения надлежащей производственной практики и стерильности.

FDA хорошо осведомлено о том, что инъекции для уменьшения жировых отложений выполняются, но агентство до сих пор не реализовало свои полномочия по ограничению использования компаундированных PPC / DC.

Безопасность и эффективность инъекционного липолиза

На сегодняшний день сообщения о безопасности и эффективности инъекционного липолиза носят анекдотический характер. Любое клиническое исследование, включающее подкожную инъекцию этих препаратов, требует одобрения FDA заявки на новый исследуемый препарат (IND) плюс одобрение IRB.

Сообщений о побочных эффектах, включая микобактерии кожных инфекций, поступали после инъекции составных препаратов для инъекционного липолиза.

Катехоламин-индуцированный липолиз вызывает диссоциацию комплекса mTOR и ингибирует захват глюкозы в адипоцитах

Значимость

Жировая ткань поддерживает метаболический гомеостаз во время голодания и питания.Когда питательных веществ много, анаболические сигналы опосредуются инсулином, стимулируя адипоциты поглощать глюкозу для хранения энергии. В отсутствие питательных веществ катаболическая передача сигналов инициирует липолиз или высвобождение липидов для использования энергии и опосредуется катехоламинами. Эти противоположные пути эволюционно законсервированы и предотвращают бесполезные циклы, но могут привести к метаболическим нарушениям, таким как резистентность к инсулину, если не регулироваться должным образом. Здесь мы определяем новый механизм, посредством которого липолиз подавляет инсулино-стимулированное поглощение глюкозы адипоцитами.Этот сигнальный механизм, вероятно, способствует инсулинорезистентности, когда липолиз активен, например, во время высокого стресса или ожирения, и это новое понимание может привести к новым подходам к лечению гипергликемии.

Abstract

Анаболические и катаболические сигналы противостоят друг другу в жировой ткани для поддержания клеточного и организменного гомеостаза, но эти пути часто не регулируются при метаболических нарушениях. Хотя давно установлено, что стимуляция β-адренорецептора ингибирует инсулино-стимулированный захват глюкозы в адипоцитах, механизм остается неясным.Здесь мы сообщаем, что β-адренергическое ингибирование захвата глюкозы требует липолиза. Мы также показали, что липолиз подавляет захват глюкозы, ингибируя мишень рапамицина (mTOR) 1 и 2 у млекопитающих посредством диссоциации комплекса. Кроме того, мы показываем, что продукты липолиза ингибируют mTOR посредством диссоциации комплекса in vitro. Эти находки раскрывают ранее нераспознанный внутриклеточный сигнальный механизм, посредством которого липолиз блокирует путь фосфоинозитид-3-киназа-Akt-mTOR, что приводит к снижению захвата глюкозы.Этот ранее неустановленный механизм регуляции mTOR, вероятно, способствует развитию инсулинорезистентности.

Жировая ткань играет важную роль в поддержании энергетического гомеостаза всего тела, накапливая или высвобождая питательные вещества. Этот баланс контролируется противоположными сигнальными путями, где анаболические процессы активируются инсулином (INS), а катаболические действия активируются катехоламинами. Важный безответный вопрос в биологии жировой ткани заключается в том, как индуцированная катехоламином β-адренергическая передача сигналов противодействует стимулированному инсулином захвату глюкозы (1-6).Удивительно, но основной механизм этого хорошо установленного физиологического ответа в адипоцитах до сих пор неизвестен.

Когда питательных веществ много, инсулин высвобождается поджелудочной железой и стимулирует абсорбцию глюкозы и жирных кислот в жировой ткани, где они упаковываются и хранятся в виде триацилглицерина (ТАГ) в каплях клеточных липидов. Передача сигналов инсулина в адипоцитах обеспечивается путем фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) –Akt – mTOR. mTOR — это высококонсервативная серин / треониновая протеинкиназа, которая функционирует в любом из двух различных мультипротеиновых комплексов: mTOR-комплекс 1 (mTORC1) и mTOR-комплекс 2 (mTORC2).mTORC1 определяется в первую очередь ассоциацией mTOR с raptor, тогда как mTORC2 включает mTOR с rictor (7). Важно отметить, что фосфорилирование mTORC2 Akt по S473 необходимо для активности Akt на AS160, что необходимо для захвата глюкозы в ответ на инсулин (8–11). Следует отметить, что как для mTORC1, так и для mTORC2 целостность этих белковых комплексов важна для специфичности киназного субстрата и правильной передачи сигналов (12, 13).

Во время голодания или стресса катехоламины высвобождаются симпатической нервной системой для активации липолиза.Стимуляция β-адренорецептора на адипоцитах активирует аденилатциклазу (AC), что приводит к повышению активности цАМФ и протеинкиназы A (PKA). PKA инициирует липолиз путем прямого фосфорилирования гормоночувствительной липазы (HSL) и перилипина (14⇓ – 16) и непрямой активации липазы триглицеридов жиров (ATGL) (17⇓ – 19). Липолиз включает гидролиз ТАГ, хранящегося в липидной капле, с образованием диацилглицерина (ДАГ), моноацилглицерина (МАГ), жирных кислот и глицерина. Эти липолитические продукты являются важными энергетическими субстратами, которые могут действовать как предшественники других липидов и влиять на передачу сигналов в клетках.Однако их потенциальная роль как сигнальных молекул недооценивается (20).

В этом исследовании мы раскрываем механизмы, которые связывают β-адренергическую стимуляцию с ингибированием стимулированного инсулином захвата глюкозы. А именно, мы показываем, что активация липолиза имеет решающее значение. Более того, мы обнаружили, что сами продукты липолиза вызывают ингибирование mTOR за счет диссоциации комплекса, что ингибирует захват глюкозы в адипоцитах. Этот механизм регуляции mTOR (т.е. путем диссоциации комплекса) имеет большое значение для регуляции клеточного метаболизма и, вероятно, способствует гипергликемии, вызванной стрессом, и инсулинорезистентности, вызванной ожирением.

Результаты

Ингибирование захвата глюкозы, индуцированное катехоламином, и передача сигналов инсулина требует липолиза.

Мыши, лишенные ATGL, демонстрируют улучшенную толерантность к глюкозе и устойчивы к инсулинорезистентности, вызванной диетой с высоким содержанием жиров (21⇓ – 23). Дефицит ATGL также улучшает передачу сигналов инсулина в белой жировой ткани (21). Эти наблюдения указывают на то, что липолиз вызывает инсулинорезистентность. Кроме того, известно, что стимуляция β-адренорецептора в изолированных адипоцитах резко ингибирует стимулируемое инсулином поглощение глюкозы (2, 3, 6).Чтобы изучить возможную роль липолиза в эффектах действия катехоламинов, мы сравнили поглощение глюкозы в первичных адипоцитах мышей WT и ATGL ^{— / —} во время лечения изопротеренолом, агонистом β-адренергических рецепторов. Как сообщалось ранее, изопротеренол ингибировал захват глюкозы в адипоцитах дикого типа; однако здесь мы показываем, что это ингибирование было устранено в отсутствие ATGL (фиг. 1 A и фиг. S1 A ). Как и ожидалось, липолиз эффективно блокировался в адипоцитах ATGL ^{— / —} даже во время лечения изопротеренолом (рис.S1 B ). Восстановление поглощения глюкозы также наблюдалось в культивируемых адипоцитах 3T3-L1 после ингибирования липазы с помощью E600, общего ингибитора липазы, который необратимо связывается с активным центром липаз (рис. S1 C ). Кроме того, передача сигналов инсулина, необходимая для транслокации GLUT4, была восстановлена в адипоцитах ATGL ^{— / —} по сравнению с WT (фиг. 1 B и фиг. S1 D и E ). Взятые вместе, эти данные показывают, что липолиз необходим для опосредованного катехоламином ингибирования захвата глюкозы адипоцитами.

Рис. 1.

Индуцированное катехоламином ингибирование захвата глюкозы и передачи сигналов инсулина требует липолиза. ( A ) Анализ поглощения глюкозы с радиоактивной меткой в WT по сравнению с первичными адипоцитами мыши ATGL ^{— / —}. Изолированные адипоциты обрабатывали инсулином (10 нМ) или без него в присутствии или в отсутствие изопротеренола (0,1 мкМ) в течение 30 минут, а затем [U-¹⁴ C] -d-глюкозы (10 мкМ) в течение 20 минут. Все анализы содержали аденозиндезаминазу (ADA) (2 единицы / мл). ( B ) Вестерн-блот-анализ передачи сигналов инсулина в первичных адипоцитах мыши WT и ATGL ^{— / —}, обработанных как в A , перед добавлением глюкозы.Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (*** P <0,001).

Путь β-адренергических / цАМФ ухудшает передачу сигналов инсулина, ингибируя комплексы mTOR.

Подобно изопротеренол-опосредованному ингибированию передачи сигналов инсулина, обработка адипоцитов форсколином, мощным активатором AC, ингибирует передачу сигналов инсулина (4, 5). Мы обнаружили, что действие форсколина значительно ингибировало mTORC1 и -2 в ответ на инсулин, что измерялось по фосфорилированию S6K (T389) и Akt (S473), соответственно (рис.2 А ). Хотя передача сигналов ниже комплексов mTOR была ингибирована, передача сигналов выше по течению не была затронута, как показано фосфорилированием тирозина рецептора инсулина и PDK1-опосредованным фосфорилированием Akt в T308 (фиг. 2 A ). Аналогичные результаты наблюдались в первичных адипоцитах крыс, обработанных изопротеренолом перед стимуляцией инсулином (фиг. S2 A ), и ингибирование AS160 как в культивируемых адипоцитах 3T3-L1, так и в первичных адипоцитах крыс (фиг. 2 A и фиг.S2 A ) демонстрирует, что активность AC играет роль в ослаблении поглощения глюкозы. Эффекты активности AC на mTOR были подтверждены обработкой проницаемым через мембрану аналогом цАМФ cpt-cAMP, ингибитором фосфодиэстеразы (PDE) 3-изобутил-1-метилксантин (IBMX) и изопротеренолом, демонстрируя, что повышенного уровня цАМФ достаточно для ингибирования mTOR. в адипоцитах (рис. 2 B и рис. S2 B ). Активацию липолиза адипоцитов измеряли по фосфорилированию HSL (рис.2 A и B и рис. S2 A ) и высвобождение глицерина (рис. S2 C и D ). Кроме того, обработка форсколином не влияла на фосфорилирование хищника AMPK (рис. S2 E ). Интересно, что форсколин не ингибирует передачу сигналов инсулина в фибробластах 3T3-L1 перед дифференцировкой в адипоциты или в первичные гепатоциты мыши (рис. S2 F ). Взятые вместе, эти данные демонстрируют, что активность цАМФ ингибирует mTOR в адипоцитах, что может играть роль в наблюдаемом вызванном катехоламином снижении поглощения глюкозы.

Рис. 2.

Путь β-адренорецепторов / цАМФ нарушает передачу сигналов инсулина, ингибируя комплексы mTOR. ( A ) Вестерн-блоттинг и количественный анализ культивированных адипоцитов 3T3-L1, обработанных форсколином или без него (FSK, 10 мкМ), рапамицином (Rap, 20 нМ) или Torin1 (250 нМ) за 30 мин до лечения инсулином (INS) , 10 нМ) в течение 15 мин. ( B ) Вестерн-блоттинг и количественный анализ культивированных адипоцитов 3T3-L1, обработанных форсколином или без него (FSK, 10 мкМ), Cpt-cAMP (Cpt, 100 мкМ), изопротеренолом (ISO, 5 мкМ) или IBMX (200 мкМ). мкМ) за 30 мин до лечения инсулином (INS, 10 нМ) за 15 мин.Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (* P <0,05 или ** P <0,01, соответственно).

cAMP-опосредованное ингибирование mTOR требует PKA и липазной активности.

Основная роль цАМФ в адипоцитах заключается в активации PKA, что приводит к липолизу за счет активации липазы и фосфорилирования перилипина (14⇓ – 16). Чтобы исследовать механизм cAMP-опосредованного ингибирования mTOR, мы фармакологически ингибировали PKA во время лечения форсколином и инсулином.АТФ-конкурентный ингибитор PKA, H89, значительно ингибировал активность PKA и восстанавливал активность как mTORC1, так и -2 в ответ на инсулин (фиг. 3 A и C ). Кроме того, блокирует действие липазы с помощью E600; атлистатин, специфический ингибитор ATGL; или CAY10499, специфический ингибитор HSL, обращал опосредованное цАМФ ингибирование mTOR (фиг. 3 B и C и фиг. S3 A ). Интересно, что блокирование действия липазы индуцировало фосфорилирование S6K во время лечения одним форсколином (рис.3 B ), тогда как адипоциты постоянно демонстрируют ингибирование mTORC1 в ответ на повышенный уровень цАМФ (24–26). Эта, казалось бы, парадоксальная тенденция может быть похожа на активацию цАМФ mTORC1 в других типах клеток (27), когда ингибирующие эффекты липолиза отсутствуют. Этого не наблюдалось в активности mTORC2 на Akt (фиг. 3 B ). Ингибирование липазы также блокировало липолиз, что измерялось по высвобождению глицерина (фиг. S3 B ). Взятые вместе, эти данные демонстрируют, что повышенный уровень цАМФ действует через PKA и активацию липолиза, нарушая активность mTOR в адипоцитах.

Рис. 3.

cAMP-опосредованное ингибирование mTOR требует активности PKA и липазы. ( A ) Вестерн-блоттинг культивированных адипоцитов 3T3-L1, предварительно обработанных H89 (10 мкМ) в течение 20 минут перед обработкой форсколином и инсулином, как на фиг. 2 A . ( B ) Вестерн-блоттинг культивированных адипоцитов 3T3-L1, предварительно обработанных диэтил-п-нитрофенилфосфатом (E600, 150 мкМ) или атглистатином (10 мкМ) перед обработкой форсколином и инсулином, как показано на фиг. 2 A . ( C ) Количественный анализ pS6K (T389) и pAKT (S473) из экспериментов в A и B .Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (* P <0,05 или ** P <0,01, соответственно).

Липолитические продукты подавляют активность mTOR in vitro.

Липолиз производит DAG, MAG, жирные кислоты и глицерин за счет действия липазы на TAG. Чтобы определить, ответственны ли эти липолитические продукты за опосредованное липолизом ингибирование mTOR, мы исследовали их способность ингибировать очищенный рекомбинантный mTOR (рис.4 A ) in vitro. Мы экстрагировали липиды из адипоцитов, обработанных липолитическими агентами форсколином или изопротеренолом или без них, и включили эти липиды в анализы киназы mTOR. Мы показываем, что липиды, экстрагированные из культивируемых адипоцитов, подвергающихся липолизу, последовательно ингибировали mTOR, тогда как липиды из контрольных клеток не имели никакого эффекта (фиг. 4 B и фиг. S4 A ). Липиды, экстрагированные из первичных адипоцитов мышей дикого типа, показали аналогичные результаты; однако липиды из контрольных или обработанных изопротеренолом адипоцитов мыши ATGL ^{— / —} не влияли на mTOR (рис.4 С ). Важно отметить, что хотя липиды, экстрагированные из контрольных клеток, не ингибировали mTOR, обработка липидов липазой in vitro действительно генерировала ингибирующие липиды (фиг. 4 D ). Чтобы исследовать, какие липиды могут быть ответственны за ингибирование mTOR, мы включили определенные жирные кислоты или глицеролипиды в анализ киназы mTOR. Они не показали значительного влияния на активность mTOR (фиг. 4 E ), предполагая, что это может быть конкретный липид, высвобождающийся во время липолиза, а не липолитические продукты в целом, которые ингибируют mTOR.Чтобы убедиться, что активность киназы была обусловлена исключительно очищенным mTOR, мы показали полное ингибирование Torin1 (фиг. S4 B ) и кинетический анализ активности mTORC1 in vitro (фиг. S4 C ). Эти данные демонстрируют, что липолитические продукты ингибируют mTOR in vitro, предполагая, что они могут способствовать индуцированному катехоламинами ингибированию захвата глюкозы в адипоцитах.

Рис. 4.

Липолитические продукты ингибируют активность mTOR in vitro. ( A ) Окрашивание Кумасси рекомбинантной очистки mTORC1, показывающее mTOR (верхняя полоса) и raptor (нижняя полоса).( B ) Анализы радиоактивной киназы mTOR in vitro с использованием очищенного рекомбинантного mTORC1 и 4E-BP1 в качестве субстрата. Липидный носитель или липиды, экстрагированные из культивируемых адипоцитов 3T3-L1, обработанных форсколином или без него (FSK, 10 мкМ) в течение 30 минут, не добавляли к анализу за 10 минут до добавления [γ- ³² P] -ATP. ( C ) Анализ киназы mTOR, как в B , с использованием липидов, экстрагированных из первичных адипоцитов мышей WT или ATGL ^{— / —} после обработки изопротеренолом (ISO, 10 мкМ) или без него в течение 30 мин.( D ) Анализы киназы mTOR, как в B , с использованием липидов, экстрагированных из культивированных адипоцитов 3T3-L1. Липиды обрабатывали липазой или без нее in vitro перед добавлением их в анализ киназы mTOR. ( E ) Анализы киназы mTOR, как в B , где DAG (в частности, 1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицерин), MAG (в частности, 2-олеоил-глицерин), олеат или пальмитат были добавлены, как указано . Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (* P <0.05 или ** P <0,01 соответственно).

Липолитические продукты ингибируют mTOR посредством комплексной диссоциации.

В наших попытках очистить mTOR из адипоцитов мы наблюдали, что комплексы mTOR 1 и 2 диссоциировали в клетках, обработанных форсколином, по сравнению с контролем (фиг. 5 A и фиг. S5 A ). Подобно спасению передачи сигналов mTOR, показанному на фиг.3 B и C , атглистатин спасает ассоциацию mTORC1 и -2 в культивируемых адипоцитах (фиг.5 B ), предполагая, что механизм индуцированного форсколином ингибирования mTOR происходит через диссоциацию комплекса mTOR. В дополнение к данным по захвату глюкозы и передаче сигналов инсулина на фиг. 1, диссоциация mTORC2 также наблюдалась у WT и спасалась в первичных адипоцитах мыши ATGL ^{— / —} (фиг. 5 C ). Эти данные демонстрируют, что липолиз необходим для наблюдаемой диссоциации комплекса mTOR. Кроме того, липидные экстракты из культивированных адипоцитов, обработанных форсколином, вызывали диссоциацию комплекса mTOR in vitro, тогда как липиды из адипоцитов, обработанных носителем, не влияли на комплекс (рис.S5 B ). Чтобы количественно показать диссоциацию mTOR in vitro, мы очистили комплекс mTOR с флуоресцентной меткой, состоящий из меченого Венерой mTOR и меченного Cerulean хищника или риктора (фиг. 5 D ). Этот рекомбинантный комплекс mTOR был полезен, поскольку флуоресцентные белковые метки могут быть обнаружены спектрофотометрически. В нашем анализе диссоциации mTOR обнаруженная эмиссия Венеры или Cerulean непосредственно представляет присутствие mTOR или raptor / rictor, соответственно (рис. S5 C ), и диссоциация может быть эффективно и количественно определена in vitro.Мы использовали этот анализ, чтобы показать, что липиды, экстрагированные из адипоцитов, обработанных форсколином, диссоциируют mTORC1 и -2 in vitro, тогда как липиды, экстрагированные из необработанных клеток, метаболиты, которые распределяются в водную фазу, или липиды из фибробластов 3T3-L1 перед дифференцировкой или первичные гепатоциты. нет эффекта (рис. 5 E ). В дополнение к передаче сигналов инсулина, показанной на фиг. 3, ингибирование липазы также блокирует диссоциацию mTOR (фиг. 5 F ). Липиды, полученные в результате обработки экстрактов клеток адипоцитов липазой in vitro, также вызывали диссоциацию mTOR, тогда как липиды, обработанные носителем, не вызывали (рис.5 G ). Взятые вместе, эти данные показывают, что липолитические продукты способствуют ингибированию mTOR за счет диссоциации комплекса mTOR.

Рис. 5.

Липолитические продукты ингибируют mTOR за счет диссоциации комплекса. ( A ) Вестерн-блот-анализ коиммунопреципитации mTORC1 и mTORC2 против raptor и rictor, соответственно, где культивированные адипоциты обрабатывали форсколином (FSK, 10 мкМ), рапамицином (Rap, 20 нМ) или Torin1 (250 нМ) или без него. за 30 мин до лечения инсулином (INS, 10 нМ) за 15 мин.( B ) Вестерн-блот-анализ коиммунопреципитации mTORC1 и mTORC2 против mTOR, где культивированные адипоциты обрабатывали атглистатином (10 мкМ) или без него в течение 1 ч перед обработкой форсколином и инсулином, как в A . ( C ) Вестерн-блот-анализ ассоциации mTORC2 с использованием коиммунопреципитации против mTOR, где первичные адипоциты мыши WT или ATGL ^{— / —} обрабатывали инсулином или без него (10 нМ) в присутствии или в отсутствие изопротеренола (0.1 мкМ) в течение 30 мин, как на рис. 1 A и B перед добавлением глюкозы. ( D ) Иллюстративное представление анализа диссоциации mTOR. ( E ) Анализ диссоциации mTOR, в котором культивированные адипоциты 3T3-L1 обрабатывали форсколином или без него (10 мкМ) перед лизисом клеток и органической экстракцией ( Материалы и методы ). Очищенные флуоресцентно меченые mTORC1 или mTORC2 инкубировали либо с лизатом, либо с экстрагированными органическими или водными фазами культивированных адипоцитов или лизатом фибробластов или гепатоцитов в течение 30 минут перед промывкой и обнаружением флуоресценции.( F ) Анализ диссоциации mTOR, в котором культивированные адипоциты 3T3-L1 обрабатывали ДМСО в качестве контроля, диэтил-п-нитрофенилфосфатом (E600, 150 мкМ) или атлистатином (10 мкМ) перед обработкой форсколином и инкубацией с флуоресцентным mTOR, как в . E . ( G ) Анализ диссоциации mTOR, в котором липиды экстрагировали из культивированных адипоцитов 3T3-L1 и обрабатывали липазой или без нее in vitro, а затем инкубировали с mTOR, как в E . Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов.# указывает на значительное отличие от контроля (^# P <0,0001).

Ингибирование захвата глюкозы, индуцированное торином-1, не зависит от липолиза.

Активность mTOR необходима для облегчения индуцированного инсулином захвата глюкозы адипоцитами (8–11). Здесь мы показываем, что стимуляция изопротеренолом β-адренергического рецептора и прямое ингибирование mTOR с помощью Torin1 ингибируют захват глюкозы в первичных адипоцитах мышей дикого типа, тогда как одного прямого ингибирования mTOR достаточно для блокирования захвата глюкозы в отсутствие ATGL (рис.6 А ). Кроме того, в то время как стимуляция β-адренорецептора подавляет передачу сигналов инсулина только в адипоцитах WT (рис. 1 B и рис. S1 D и E ), Torin1 ингибирует передачу сигналов инсулина как в WT, так и в ATGL ^{— / —} адипоцитов (рис. 6 B ). Взятые вместе, эти данные предполагают, что ингибирование mTOR липолизом является вероятным механизмом индуцированного катехоламином ингибирования захвата глюкозы в адипоцитах.

Рис. 6. Ингибирование захвата глюкозы, индуцированное

Torin1, не зависит от липолиза.( A ) Анализ поглощения глюкозы с радиоактивной меткой в WT по сравнению с первичными адипоцитами мыши ATGL ^{— / —}. Изолированные адипоциты обрабатывали или без Torin1 (250 нМ) в течение 10 минут перед обработкой или без инсулина (10 нМ) в присутствии или в отсутствие изопротеренола (0,1 мкМ) в течение 30 минут с последующим добавлением [U- ¹⁴ C] -d-глюкоза (10 мкМ) в течение 20 мин. Все анализы содержали аденозиндезаминазу (ADA) (2 единицы / мл). ( B ) Вестерн-блот-анализ передачи сигналов инсулина в первичных адипоцитах мыши WT и ATGL ^{— / —}, обработанных как в A , перед добавлением глюкозы.( C ) Иллюстрация предложенного механизма, связывающего стимуляцию β-адренорецептора с нарушением захвата глюкозы в адипоцитах. Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (*** P <0,001).

Обсуждение

Главный вывод этого исследования состоит в том, что липолиз резко ингибирует стимулируемое инсулином поглощение глюкозы в адипоцитах. Способность катехоламинов снижать захват глюкозы адипоцитами известна в течение десятилетий и неоднократно подтверждена документально (2-6), но механизм остается неясным.Здесь мы не только показываем, что липолиз необходим для опосредования этого ингибирования захвата глюкозы, но и что механизм ингибирования может происходить через диссоциацию комплексов mTOR и последующее ингибирование стимулируемой инсулином активности Akt. Интересно, что передача сигналов mTOR и комплексная ассоциация восстанавливаются, когда липолиз ингибируется, и липолитические продукты, которые распределяются в органическую фазу, способны напрямую диссоциировать mTOR in vitro, предполагая, что эти липиды могут действовать как сигнальные молекулы для регулирования действия инсулина.Липолитические продукты, произведенные in vitro, также ингибируют mTOR посредством диссоциации, предполагая, что дальнейшая ферментативная активность не требуется для липолиза, чтобы опосредовать эти эффекты на mTOR. Хотя недавно было показано, что липолитические продукты могут активировать рецепторы, активируемые пролифератором пероксисом (PPAR) α и δ (28), потенциально влияя на передачу сигналов инсулина через экспрессию PTEN, наши открытия, что липолиз не влияет на передачу сигналов инсулина выше mTOR, предполагает, что это не так. механизм инсулинорезистентности в нашей модели.

Липотоксичность — одна из исследуемых гипотез для объяснения механизмов, с помощью которых ожирение вызывает инсулинорезистентность. Также известная как теория липидных метаболитов, липотоксичность характеризуется избытком липидов, которые могут действовать как сигнальные молекулы, подавляя передачу сигналов инсулина (29–31). Предыдущие данные показали, что инсулинорезистентность часто связана с накоплением липидов в печени и скелетных мышцах, а высокий уровень циркулирующих липолитических продуктов может коррелировать с ожирением и инсулинорезистентностью при диабете 2 типа (32, 33).Важно отметить, что накопление липидов в печени, как было показано, специфически ингибирует передачу сигналов инсулина за счет снижения целостности и активности комплекса mTORC2 (34). Кроме того, уровни базального липолиза повышаются при ожирении (35, 36), а снижение липолиза из-за дефицита липазы у мышей снижает резистентность к инсулину, вызванную диетой (22, 37). Взятые вместе, эти наблюдения предполагают участие липолитических продуктов в развитии инсулинорезистентности, и здесь мы демонстрируем, что липиды, высвобождаемые во время липолиза, оказывают локальное влияние на передачу сигналов mTOR и стимулируемое инсулином поглощение глюкозы в адипоцитах.

Хотя инсулинорезистентность зависит от действия инсулина во многих тканях, у мышей GLUT4 ^{— / —}, специфичных для жировой ткани, развивается системная резистентность к инсулину и гипергликемия (38), тогда как гиперэкспрессия GLUT4, специфическая для жировой ткани, приводит к повышенной чувствительности к инсулину in vivo (39). Это указывает на то, что нарушения действия инсулина только в жировой ткани достаточно, чтобы вызвать инсулинорезистентность всего тела и гипергликемию. Наша предыдущая работа также демонстрирует, что нарушение действия инсулина из-за снижения экспрессии риктора в жировой ткани приводит к инсулинорезистентности всего тела и гипергликемии (11).Взятые вместе, наша работа показывает ингибирование комплекса mTOR как остро регулируемое событие, которое приводит к нарушению передачи сигналов инсулина в адипоцитах, что может влиять на развитие системной инсулинорезистентности. Это исследование также демонстрирует ранее не идентифицированный механизм диссоциации и ингибирования комплекса mTOR липолитическими продуктами. Этот механизм подчеркивает важность липолиза в регуляции клеточных сигнальных событий как потенциального следствия высвобождения запасов энергии.

В дополнение к механистическим деталям противоположных действий анаболической и катаболической передачи сигналов в жировой ткани, наши результаты напрямую подразумевают липолиз как механизм, лежащий в основе резистентности жировой ткани к инсулину во время острых стрессовых событий, и могут дать представление об инсулинорезистентности, вызванной ожирением.Острая гипергликемия часто развивается после травмы или серьезного хирургического вмешательства, особенно хирургического вмешательства в брюшной полости (40), после тяжелых ожоговых травм или сепсиса. При отсутствии лечения это состояние, называемое гипергликемией, вызванной стрессом, способствует смертности и задерживает заживление послеоперационных больных и пациентов в отделениях интенсивной терапии (41). Хотя влияние стресса на действие инсулина хорошо известно, механистическая связь остается неясной. Реакция на стресс — это эволюционная адаптация, которая сохраняет глюкозу для жизненно важных тканей, таких как мозг, во время травмы.Этот ответ характеризуется быстрой активацией нейроэндокринной и воспалительной систем, вызывающей метаболическое состояние стресса. В результате анаболические процессы подавляются, тогда как катаболические процессы, такие как липолиз, усиливаются, высвобождая субстраты для заживления тканей (41–43). Наше открытие о том, что липолиз играет ключевую роль в снижении передачи сигналов инсулина, предполагает, что он может быть фактором, способствующим развитию гипергликемии, вызванной стрессом.

У людей с ожирением, хотя катехоламиновая стимуляция липолиза иногда ослаблена, базальные уровни липолиза обычно повышены.Таким образом, помимо острых событий, исследованных в этом отчете, интересно рассмотреть роль липолиза и ингибирования сигнальных путей mTOR в жировой ткани в развитии инсулинорезистентности, вызванной ожирением, с течением времени. Помимо β-адренергической стимуляции, липолиз усиливается воспалительными цитокинами, натрийуретическими пептидами, гормонами роста и кортизолом (44), подчеркивая, что многие факторы могут вносить свой вклад в этот механизм инсулинорезистентности.Хотя мы показали, что острая стимуляция липолиза может ингибировать захват глюкозы за счет диссоциации комплекса mTOR, необходимы дальнейшие исследования для определения вклада липолиза в инсулинорезистентность, вызванную ожирением.

В этом исследовании мы определили новый механизм передачи сигналов адипоцитов, посредством которого липолитические продукты диссоциируют комплексы mTOR, что приводит к снижению стимулируемого инсулином захвата глюкозы (рис. 6 C ). Эта модель имеет значение для инсулинорезистентности, вызванной ожирением, и гипергликемии, вызванной стрессом, и демонстрирует, что липолитические продукты могут действовать как сигнальные молекулы для регулирования клеточных процессов.Это также дает представление о механизмах противоположной регуляции анаболической и катаболической передачи сигналов в жировой ткани.

Материалы и методы

Экстракция липидов и диссоциация mTOR in vitro.

Адипоциты 3T3-L1 из 6-см планшетов или 100 мкл упакованных изолированных адипоцитов дважды промывали PBS, гомогенизировали в 100 мкл буфера A (1 мМ EDTA, 1 мМ EGTA, 1 мМ DTT, 0,1% Tween 20, 10 мМ фосфат натрия и 50 мМ β-глицерофосфат, pH 7,4), с добавлением 1 мМ фенилметилсульфонилфторида, 10 мкг / мл лейпептина, 10 мкг / мл апротинина, 10 мкг / мл пепстатина и 0.LR микроцистина 5 мкм и гомогенаты центрифугировали при 16000 × g в течение 10 мин. Всего добавляли 400 мкл гексана / этилацетата (1: 1) и смешивали с супернатантами в течение 30 минут с последующим центрифугированием при 8000 × g в течение 2 минут. Водную и органическую фазы разделяли и органический растворитель выпаривали. Высушенный липидный остаток солюбилизировали суспензией в буфере А (содержащий 0,1% Твин 20) и смешивали с флуоресцентно меченным иммунным комплексом mTOR – Raptor или mTOR – Rictor на шариках в течение 30 мин при комнатной температуре.Затем шарики трижды промывали, переносили в 96-луночный планшет и определяли выбросы Венеры и Церулеана. Для обработки липазой in vitro ресуспендированные липиды обрабатывали липазой (2 единицы / мл) в течение 30 минут при комнатной температуре и липиды реэкстрагировали, как описано. Рекомбинантные флуоресцентно меченые комплексы mTOR-Raptor и mTOR-Rictor были получены путем временной трансфекции в клетки HEK293T с использованием липофектамина 2000 (Invitrogen). Плазмиды HA-Venus-mTOR и FLAG-Cerulean-Raptor / FLAG-Cerulean-Rictor трансфицировали с использованием 40 и 10 мкг плазмиды на 15-см планшет, соответственно, и липофектамина 2000 при соотношении ДНК: липофектамин 2: 1.

Статистический анализ.

Значения выражены как среднее ± SEM. Сравнение между двумя группами одного и того же лечения (стимулированного инсулином) проводилось с использованием теста Стьюдента t . Сравнения между более чем двумя группами проводились с помощью однофакторного дисперсионного анализа с апостериорным анализом Даннета (INS установлен в качестве контроля). Данные представлены в трех экземплярах из трех отдельных экспериментов, если не указано иное. Значимость обозначена * P <0,05, ** P <0.01, *** P <0,001 или ^# P <0,0001 соответственно.

Реагенты

антитела, культура клеток, вестерн-блоттинг и количественный анализ, уход за животными, выделение первичных адипоцитов, поглощение глюкозы, иммунопреципитация mTOR, очистка mTOR, анализ киназы mTOR и измерения глицерина, глицеролипидов и жирных кислот подробно описаны в материалах SI и Методы .

Благодарности

Мы благодарим Эвана Таддео за выделение первичных гепатоцитов мыши.Это исследование финансировалось грантами Американской диабетической ассоциации для младших преподавателей 7-11-JF-21 и R01 1R01DK101946 (для TEH), R01 R01DK096076 (для Нидерландов), грантами от бельгийских Fonds de la Recherche Scientifique (для PPR), American Heart Предфинансовая стипендия ассоциации 14PRE20480252 (для GRM) и стипендии Телеви (для С. Бланквера).

Сноски

Вклад авторов: G.R.M., L.W., and T.E.H. спланированное исследование; G.R.M., L.W., V.R., S.G.S., R.C.G., S.Борода, J.M.E., S. Blancquaert, T.E.H. проведенное исследование; G.R.M., L.W. и T.E.H. внесены новые реагенты / аналитические инструменты; G.R.M., L.W., P.P.R., N.L. и T.E.H. проанализированные данные; и G.R.M. и T.E.H. написал газету.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Эта статья представляет собой прямое представление PNAS.
Эта статья содержит вспомогательную информацию на сайте www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10.